[发明专利]基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系及制备方法

权利要求书

1.基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：通过细乳液聚合法制备出含羧基的负载阿霉素的纳米凝胶NL@DOX；

步骤2：采用N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺酸盐活化后，将氨基化石墨烯量子点与含有羧基基团的负载阿霉素的纳米凝胶通过氨羧络合反应结合，再键合含有氨基的主动靶向药物赫赛汀，制备得基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系FNL@DOX@Herceptin。

2.根据权利要求1所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：所述的步骤1，包括如下具体步骤：

A、将0.129g N-异丙基丙烯酰胺、0.009～0.03g聚丙烯酸、0.02～0 .08g十二烷基硫酸钠和0.002～0.008g阿霉素溶于100ml蒸馏水中，记作水相；将水相倒入避光处理的三口烧瓶中，将0.08～0.092g聚乙二醇甲基丙烯酸酯和0.01～0.045g二乙烯苯溶于3～7ml二甲亚砜中，记作油相；

B、将油相匀速滴加到水相中，同时机械搅拌1～3h，滴加完成后超声处理1～5h，得预乳液，将预乳液置于冰水混合物中超声细乳化10～35min，得细乳液；

C、向细乳液中通入氮气10～25min，升温至55～85℃，加入0.005～0.018g过硫酸钠，通入氮气10～25min，持续搅拌过夜，得到负载DOX的纳米凝胶NL@DOX。

3.根据权利要求2所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：

所述步骤1 A中，聚丙烯酸为0.009g，十二烷基硫酸钠为0.04g，阿霉素为0.005g，聚乙二醇甲基丙烯酸酯为0.08g，二乙烯苯为0.0198g，二甲亚砜为5ml；

所述步骤1B中，搅拌时间为2h，超声时间为3h，超声细乳化时间为20min；

所述步骤1C中，所述，第一次通入氮气的时间为15min，水浴升温为70℃，过硫酸钠为0.007g，第二次通入氮气的时间为15min。

4.根据权利要求1所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：所述的步骤2，包括如下具体步骤：

A、取8～20ml的负载DOX的纳米凝胶倒入避光处理的离心管中，加入N-羟基琥珀酰亚胺，25℃条件下振荡20～40min，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺酸盐，振荡1～3h，得到活化液；

B、将实验室自制的氨基化石墨烯量子点加入活化液中，再加入赫赛汀后振荡过夜，将产物用M＝12000～16000的透析膜透析3～5天，得到基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系FNL@DOX@Herceptin。

5.根据权利要求4所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：

所述步骤2A中，N-羟基琥珀酰亚胺为5.7mg，第一次室温振荡时间为30min，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺酸盐为6.7mg，第二次室温振荡时间为2h；

所述步骤2B中，实验室自制的氨基化石墨烯量子点为40ul，赫赛汀为0.4mg。

6.根据权利要求1或2或3所述的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：

采用红外光谱仪、纳米粒度仪、透射电镜、荧光光谱仪对基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系进行基础性能表征；

通过紫外分光光度计、酶标仪、荧光显微镜对基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的药物负载情况、缓释性能进行研究，以及与乳腺癌MCF-7细胞共培育用MTT法进行细胞毒性测试。

7.权利要求1-6任一制备方法制备的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系。