[发明专利]酒醅、黄浆水、白酒中二氢阿魏酸及阿魏酸的同时测定方法

权利要求书

1.酒醅、黄浆水、白酒中二氢阿魏酸及阿魏酸的同时测定方法，其特征在于：

利用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱联用，首先对样品进行前处理，然后通过HSS T3色谱柱进行梯度洗脱分离，随后采用电喷雾离子源，在负离子模式下进行扫描，对二氢阿魏酸及阿魏酸对应的特征离子进行提取并获得积分峰面积，从而实现对二氢阿魏酸及阿魏酸的快速分析鉴定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：待测样品的前处理

酒醅：取待测样品5g，加入20mL 60％vol乙醇水溶液，旋涡震荡10min，离心取上清液，过0.22μm滤膜后待测；

黄浆水：SPE小柱经活化、萃取，取6mL黄浆水上样富集、洗脱，再经氮吹到1mL过0.22μm滤膜待测；

白酒：取白酒2L于真空旋蒸仪，60℃旋转至200mL，-80℃冷冻干燥至固体，再加入甲醇5mL溶解，经0.22μm滤膜待测；

步骤2：标准品的配制

将二氢阿魏酸及阿魏酸分别用乙腈溶解，配成母液标品，母液标品中二氢阿魏酸400mg/L、阿魏酸400mg/L；

步骤3：标准曲线的绘制

采用外标法定量，将步骤2配制的二氢阿魏酸及阿魏酸的两种母液标品混合配成混合标准储备液，然后用乙腈-水溶液逐级稀释获得不同浓度的混合标准品溶液，以每个浓度下标准品对应的母离子提取离子色谱图中的积分峰面积为纵坐标，该标准品的浓度为横坐标，建立标准曲线，分别获得二氢阿魏酸及阿魏酸的标准曲线；

步骤4：待测样品的检测

将经步骤1前处理后的待测样品送样检测，将获得的待测样品谱图与标准品谱图对比，保留时间相同的即为对应物质，然后通过标准曲线线性回归方程获得对应二氢阿魏酸及阿魏酸的含量。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

测定过程中，色谱检测条件设置如下：

色谱柱：ACQUITY UPLC T3 2.1x 100mm，1.8μm；

流动相：流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈，梯度洗脱；

柱温：35℃；

进样量：2μL。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

梯度洗脱程序设置为：0-2min，95％A+5％B；2-4min，95％A+5％B～70％A+30％B；4-7min，70％A+30％B～30％A+70％B；7-7.1min，70％A+30％B～95％A+5％B；7.1-10min，95％A+5％B，流速0.6mL/min。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

测定过程中，质谱检测条件设置如下：

质谱仪UPLC-Q-Tof/MS：电喷雾离子源，负离子扫描模式，target ms：193.0504，离子源温度120℃，脱溶剂温度450℃，脱溶剂气流量800L/h，锥孔气流量50L/h，扫描范围50-300Da，毛细管电压：2.5kV，取样锥孔电压：20V，扫描时间：0.5S，参比质量：亮氨酸脑啡呔[M-H]-＝554.2615。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

步骤3中，混合标准品溶液中二氢阿魏酸、阿魏酸的浓度范围分别为250-600μg/L。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

二氢阿魏酸及阿魏酸分别对应的母离子为：二氢阿魏酸m/z 195.2165、阿魏酸m/z193.0545。