[发明专利]一种α9α10 nAChR抑制活性肽及其应用

权利要求书

1.一种活性多肽，其特征在于与α-芋螺毒素活性单体肽相比具有一个或多个半胱氨酸残基的删除或缺失突变；

其中，所述α-芋螺毒素活性单体肽具有结合nAChR的功能。

2.如权利要求1所述活性多肽，其特征在于所述α-芋螺毒素活性单体肽包括至少三个连续的精氨酸残基，并具有1个、2个、3个、4个或5个半胱氨酸残基。

3.如权利要求1所述活性多肽，其特征在于所述α-芋螺毒素活性单体肽包括α-芋螺毒素天然单体肽，以及在α-芋螺毒素天然单体肽氨基酸序列的基础上缺失C端和/或N端的一个或数个氨基酸残基。

4.如权利要求3所述活性多肽，其特征在于所述α-芋螺毒素天然单体肽来源于选自下组的α-芋螺毒素，GeXIVA、GeXXVIIA、Vc1.1、PeIA、RgIA、B-VxXXIVA、S-GVIIIB、D-GeXXA、O-GeXXVIIA、D--Lt28.1、Mr1.1、BuIA、ImI、或AuIB；所述α-芋螺毒素天然单体肽包括α-芋螺毒素的成熟肽单体、前体肽单体。

5.如权利要求3所述活性多肽，其特征在于所述α-芋螺毒素天然单体肽包括SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

6.如权利要求1所述活性多肽，其特征在于所述活性多肽不含有半胱氨酸残基、不形成分子内二硫键或分子间二硫键，且其氨基酸残基数10。

7.如权利要求1所述活性多肽，其特征在于所述活性多肽包含SEQ ID NO:3所示的序列，且具有12-20个氨基酸残基。

8.如权利要求1至7中任一项所述活性多肽，其包括具有选自SEQ ID NO:4-9中任一所示氨基酸序列结构的线性肽、环肽、或D型氨基酸替换衍生肽。

9.如权利要求1至7中任一项所述活性多肽，其包括SEQ ID NO:4-9中任一所示多肽氨基酸序列的基础上进行氨基酸扫描突变获得的突变体，所述氨基酸扫描突变包括正电荷氨基酸扫描突变、负电荷氨基酸扫描突变、中性氨基酸扫描突变、稀有氨基酸替换突变、以及D型氨基酸替换突变。

10.如权利要求9所述活性多肽，其中，正电荷氨基酸扫描突变包括精氨酸扫描突变；负电荷氨基酸扫描突变包括天冬氨酸扫描突变；中性氨基酸扫描包括丙氨酸扫描突变；稀有氨基酸替换突变包括将所述多肽链上的精氨酸残基逐一用瓜氨酸残基替换获得突变体；D型氨基酸替换突变包括在SEQ ID NO:4-9所示序列的基础上逐一对每个氨基酸残基采用其相应的D型氨基酸残基替换获得突变体。

11.如权利要求10所述活性多肽，其具有SEQ ID NO:10-73任一所述氨基酸序列，优选具有SEQ ID NO:5、20、21、22、23、30、34、46、50、51、53、66、或69所示的氨基酸序列。

12.一种制备活性多肽的方法，包括将α-芋螺毒素天然单体肽氨基酸序列中的一个或多个半胱氨酸残基删除，所述α-芋螺毒素天然单体肽具有结合nAChR的功能。

13.如权利要求12所述制备活性多肽的方法，其特征在于还包括将α-芋螺毒素天然单体肽在C端和或N端截短。

14.如权利要求12所述制备活性多肽的方法，其特征在于所述α-芋螺毒素天然单体肽来源于选自下组的α-芋螺毒素，GeXIVA、GeXXVIIA、Vc1.1、PeIA、RgIA、B-VxXXIVA、S-GVIIIB、D-GeXXA、O-GeXXVIIA、D--Lt28.1、Mr1.1、BuIA、ImI、或AuIB；所述α-芋螺毒素天然单体肽包括α-芋螺毒素的成熟肽单体、前体肽单体。