[发明专利]一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用

说明书

本发明提供了一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用，间充质干细胞和外泌体联合制剂包括间充质干细胞和外泌体。间充质干细胞在培养过程中会分泌大量的外泌体，间充质干细胞分泌的外泌体能够调节局部组织微环境，促进血管新生，改善局部供血，恢复心室壁厚度、改善心梗大鼠的左心室射血分数，从而达到改善大鼠心脏功能的效果。并且间充质干细胞本身具有一定的治疗心肌梗死效果，外泌体悬液能够为间充质干细胞提供更好的生存环境，能够最大限度地维持细胞的活性和功能。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用。

背景技术

心肌梗死是冠状动脉急性、持续性缺氧所引起的心肌坏死。临床上多有剧烈而持久的胸骨后疼痛，休息及硝酸酯类药物不能完全缓解，伴有血清心肌酶活性增高及进行性心电图变化，可并发心律失常、休克或心力衰竭。急性心肌梗死是危害人类健康的重大疾病，在发达国家被成为“头号杀手”，是世界范围的主要死亡原因之一。AMI 发病率的增加给个人、家庭和社会带来沉重的负担，控制AMI发病率，提高AMI的救治水平，成为心血管领域的一个重要课题。

间充质干细胞作为一种组织来源的间充质干细胞，是一类具有自我更新和多项分化潜能的多能干细胞，由于其取材方便和不具有免疫排斥反应，是再生医学中一种较为理想的种子细胞。研究显示，干细胞行驶生物学功能的最重要途径是通过分泌大量生物活性因子，进而调节病变组织的机能、促进血管再生、加速组织再生修复等。而大量的生物活性因子的分泌途径主要是通过外泌体，一种生物膜包裹的，直径在40-100 nm不等的分泌小泡。越来越多的研究发现干细胞分泌的外泌体可在急性期减少细胞凋亡、减轻炎症反应、减少心肌梗死面积，后期促进血管生成，抑制纤维化，减轻心肌重构从而改善心肌梗死后的心脏功能。

当前的细胞移植疗法可促进梗死局部血管新生和心肌再生，进而改善心肌梗死后的心功能，而且其在心血管病治疗上的安全性和有效性已得到证实，为受损的心脏修复提供了巨大的希望，但其移植后的低生存率、低定植率、且难以向心血管细胞谱系分化等问题成为制约其疗效的关键因素。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用，间充质干细胞和外泌体联合制剂包括间充质干细胞和外泌体。

在治疗心肌梗死方面，间充质干细胞能够迁移到损伤部位分泌大量生物活性因子，进而调节病变组织的机能、促进血管再生、加速组织再生修复。外泌体能够在心肌细胞、心脏成纤维细胞、内皮细胞及心脏干细胞间进行分子信号传导以及生物信号信息的传递，广泛参与了细胞存活、心肌梗死、心室重构及心脏再生等心血管系统的生理和病理过程。所以将二者联合使用，可以提高间充质干细胞的存活，使其更好地发挥有效作用，从而更好的治疗心肌梗死。

优选地，所述外泌体为间充质干细胞的同源外泌体。培养间充质细胞的过程中，通过对间充质干细胞饥饿培养的方法，促进其生物活性物质的分泌，获得同源外泌体，以外泌体的形式回收同源干细胞分泌的生物活性物质回收方式更为简便。

优选地，所述间充质干细胞选自骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或牙髓间充质干细胞。

本发明提供一种间充质干细胞和外泌体联合制剂的制备方法，包括如下步骤：

（1）将间充质干细胞诱导培养分化，回收干细胞；

（2）从步骤（1）所述的间充质干细胞中获得同源外泌体，制备成外泌体悬液；

（3）将步骤（1）获得的干细胞重悬于步骤（2）获得的外泌体悬液中，制备成联合制剂。