[发明专利]一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用在审
申请号: | 202011374133.7 | 申请日: | 2020-11-30 |
公开(公告)号: | CN112402458A | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
发明(设计)人: | 蒲锋星 | 申请(专利权)人: | 陕西佰傲干细胞再生医学有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61P9/10;C12N5/0775 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 间充质 干细胞 外泌体 联合 制剂 制备 心肌梗死 药物 中的 应用 | ||
1.一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用,其特征在于,间充质干细胞和外泌体联合制剂包括间充质干细胞和外泌体。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述外泌体为间充质干细胞的同源外泌体。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述间充质干细胞选自骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或牙髓间充质干细胞。
4.一种间充质干细胞和外泌体联合制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将间充质干细胞诱导培养分化,回收干细胞;
(2)从步骤(1)所述的间充质干细胞中获得同源外泌体,制备成外泌体悬液;
(3)将步骤(1)获得的干细胞重悬于步骤(2)获得的外泌体悬液中,制备成联合制剂。
5.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)选择3~5代间充质干细胞在含10%胎牛血清的α-MEM培养基诱导培养,待细胞融合率达到85%~95%时,消化回收细胞。
6.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)选择3~5代间充质干细胞在10%胎牛血清的α-MEM培养基诱导培养,待细胞融合率达到70%时,更换不含血清的α-MEM培养基,37℃孵箱中孵育72h后回收培养上清,过滤后通过超速离心法分离纯化得到外泌体。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述超速离心法包括如下步骤: 4℃离心机800×g离心5分钟,回收上清;2000×g离心10分钟,回收上清;16000×g离心30分钟,回收上清;150000×g离心90分钟,弃上清,150000×g离心90分钟,弃上清。
8.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中干细胞在联合制剂中的含量为0.5×106~2×106个/100μL。
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