[发明专利]一种液基细胞制片机的制片方法

说明书

本发明公开了一种液基细胞制片机的制片方法，包括以下步骤：预处理：将预处理后的液基样本逐个放入处理器皿中，对液基样本分别进行37℃孵育，反应体系切换，冲洗红细胞去除，换PBS缓冲液，加入磁珠去除白细胞干扰等处理。本发明通过设置预处理、加入细胞保存液、沉淀、染色和离心制片的工艺流程，解决了目前的细胞制片方法制片质量差，容易丢失有效诊断细胞，涂片厚薄不一，易漏诊，而且样本中常常残有很多的白细胞和红细胞，影响观察的问题，该液基细胞制片机的制片方法，具备保存细胞稳定性高、细胞固定良好和保留细胞形态更完整，也能清除多余细胞的优点。

技术领域

本发明涉及细胞制片技术领域，具体为一种液基细胞制片机的制片方法。

背景技术

基细胞学检查，是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断。与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比，液基细胞学检查明显提高了样本的满意度及宫颈异常细胞检出率，液基细胞学检查是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术。

细胞制片方法是常用的一种制片方法，但是目前的细胞制片方法制片质量差，容易丢失有效诊断细胞，涂片厚薄不一，易漏诊，而且样本中常常残有很多的白细胞和红细胞，影响观察。为此提出一种保存细胞稳定性高、细胞固定良好和保留细胞形态更完整，也能清除多余细胞的制片方法来解决此问题。

发明内容

本发明的目的在于提供液基细胞制片机的制片方法，具备保存细胞稳定性高、细胞固定良好和保留细胞形态更完整，也能清除多余细胞的优点，解决了目前的细胞制片方法制片质量差，容易丢失有效诊断细胞，涂片厚薄不一，易漏诊，而且样本中常常残有很多的白细胞和红细胞，影响观察的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种液基细胞制片机的制片方法，包括以下步骤：

S1：预处理：将预处理后的液基样本逐个放入处理器皿中，对液基样本分别进行37℃孵育，反应体系切换，冲洗红细胞去除，换PBS缓冲液，加入磁珠去除白细胞干扰等处理；

S2：细胞处理保存：将液基标本加入到细胞保存液中，充分震荡；

S3：沉淀：处理后的液基样本倒入沉降仓，静置沉降，吸去上清；

S4：染色：液基样本静置沉降，吸去上清后置入无水乙醇或异丙醇，置入镁盐缓冲液，置入苏木素染液，置入镁盐缓冲液，置入无水乙醇或异丙醇，置入巴氏染色液，置入无水乙醇或异丙醇，重复2遍，置于二甲苯；

S5：离心制片，将染色后的液基样本转移出沉降仓，进入离心机的制片仓，自动启动离心机，使制片仓中的细胞通过离心重力的作用，比重较大的阳性细胞优先沉淀到病理玻片上，形成均匀的细胞层。

优选的，所述在S1中，预处理包括液基样本整理、摆放、编码。

优选的，所述在S1中，37℃孵育的时间为8-12min，反应体系切换为生理盐水体系。

优选的，所述在S1中，冲洗红细胞去除采用的冲洗液为生理盐水，冲洗时间为3-5min。

优选的，所述在S2中，细胞保存液由如下重量份的原料组成：乙醇35份、柠檬酸钠3份、氯化钠5份、N-乙酰半胱氨酸7份、二硫代苏糖醇6份、脯氨酸3份。

优选的，所述在S2中，液基标本与细胞保存液加入的体积比为一比三。

优选的，所述在S3中，静置时间为3小时。

优选的，所述在S4中，置入无水乙醇或异丙醇10-12秒，置入镁盐缓冲液5-8秒，置入苏木素染液3-6分钟，置入镁盐缓冲液0.8-1.2分钟，置入无水乙醇或异丙醇，重复2遍，置入巴氏染色液2-4分钟，置入无水乙醇或异丙醇9-12秒，重复2遍，置于二甲苯8-12秒，重复2遍。

优选的，所述在S5中，离心机进行制片时，离心速度为800r/min，离心时间为6min。