[发明专利]一种液基细胞制片机的制片方法在审
| 申请号: | 202011329696.4 | 申请日: | 2020-11-24 |
| 公开(公告)号: | CN114544279A | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
| 发明(设计)人: | 王洋 | 申请(专利权)人: | 湖北欣立达科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 432000 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 细胞 制片 方法 | ||
1.一种液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1:预处理:将预处理后的液基样本逐个放入处理器皿中,对液基样本分别进行37℃孵育,反应体系切换,冲洗红细胞去除,换PBS缓冲液,加入磁珠去除白细胞干扰等处理;
S2:细胞处理保存:将液基标本加入到细胞保存液中,充分震荡;
S3:沉淀:处理后的液基样本倒入沉降仓,静置沉降,吸去上清;
S4:染色:液基样本静置沉降,吸去上清后置入无水乙醇或异丙醇,置入镁盐缓冲液,置入苏木素染液,置入镁盐缓冲液,置入无水乙醇或异丙醇,置入巴氏染色液,置入无水乙醇或异丙醇,重复2遍,置于二甲苯;
S5:离心制片,将染色后的液基样本转移出沉降仓,进入离心机的制片仓,自动启动离心机,使制片仓中的细胞通过离心重力的作用,比重较大的阳性细胞优先沉淀到病理玻片上,形成均匀的细胞层。
2.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S1中,预处理包括液基样本整理、摆放、编码。
3.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S1中,37℃孵育的时间为8-12min,反应体系切换为生理盐水体系。
4.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S1中,冲洗红细胞去除采用的冲洗液为生理盐水,冲洗时间为3-5min。
5.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S2中,细胞保存液由如下重量份的原料组成:乙醇35份、柠檬酸钠3份、氯化钠5份、N-乙酰半胱氨酸7份、二硫代苏糖醇6份、脯氨酸3份。
6.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S2中,液基标本与细胞保存液加入的体积比为一比三。
7.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S3中,静置时间为3小时。
8.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S4中,置入无水乙醇或异丙醇10-12秒,置入镁盐缓冲液5-8秒,置入苏木素染液3-6分钟,置入镁盐缓冲液0.8-1.2分钟,置入无水乙醇或异丙醇,重复2遍,置入巴氏染色液2-4分钟,置入无水乙醇或异丙醇9-12秒,重复2遍,置于二甲苯8-12秒,重复2遍。
9.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S5中,离心机进行制片时,离心速度为800r/min,离心时间为6min。
10.根据权利要求1所述的液基细胞制片机的制片方法,其特征在于:所述在S5中,封片采用的封片试剂为紫外光固化胶。
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