[发明专利]多样性抗体产生细胞的细胞库及其用途

权利要求书

1.一种多样型抗体产生细胞的细胞库，所述细胞库中的抗体产生细胞的抗体基因包含多种抗体重链可变区的编码序列。

2.如权利要求1所述的细胞库，其特征在于，所述抗体重链可变区包含来自不同供体细胞的抗体重链可变区基因的重链V区段、重链D区段、或重链J区段，或其任意组合。

3.如权利要求1或2所述的细胞库，其特征在于，

所述细胞库中的抗体产生细胞的抗体基因包含多种重链V区段，优选地，所述重链V区段选自Gene ID:3492中的任何一个或多个重链V区段，和/或

所述细胞库中的抗体产生细胞的抗体基因包含多种重链D区段，优选地，所述重链D区段选自Gene ID:3492中的任何一个或多个重链D区段，和/或

所述细胞库中的抗体产生细胞的抗体基因包含多种重链J区段，优选地，所述重链J区段选自Gene ID:3492中的任何一个或多个重链J区段，

更优选地，所述抗体重链可变区选自Gene ID:3492所示抗体重链基因座中所列的任意重链可变区。

4.如权利要求1或2所述的细胞库，其特征在于，所述抗体产生细胞是分离的哺乳动物抗体产生细胞，

优选地，所述分离的哺乳动物抗体产生细胞是人源B细胞系细胞。

5.如权利要求1或2所述的细胞库，其特征在于，所述抗体产生细胞的抗体基因的重链可变区编码序列的体细胞超突变增加，优选地，所述抗体产生细胞经工程改造使得Spt5的表达降低，和/或所述抗体产生细胞表达HIV Tat蛋白或其具有转录因子结合功能的片段，和/或所述抗体产生细胞表达激活诱导脱氨酶或其具有激活诱导脱氨功能的片段。

6.一种扩展抗体产生细胞的细胞库多样性的方法或制备多样型抗体产生细胞的细胞库的方法，包括

(1a)通过基因改造在细胞库的抗体产生细胞中引入多种抗体重链可变区的编码序列，或

(1b)通过基因改造在细胞库的抗体产生细胞中引入多种重链可变区编码序列的区段，优选地，多种重链可变区编码序列的区段选自以下的一项或多项：多种重链V区段、多种重链D区段和多种重链J区段，和

(2)使抗体产生细胞与增加抗体基因座体细胞超突变的试剂接触，和

任选的(3)通过基因改造在抗体产生细胞中引入多种抗体重链恒定区、多种抗体轻链可变区和/或多种抗体轻链恒定区的编码序列。

7.一种体外进化筛选细胞的方法，所述细胞生产具有抗原特异性活性的抗体，所述方法包括

(1a)通过基因改造在细胞库的抗体产生细胞中引入多种抗体重链可变区的编码序列，或

(1b)通过基因改造在细胞库的抗体产生细胞中引入多种重链可变区编码序列的区段，优选地，多种重链可变区编码序列的区段选自以下的一项或多项：多种重链V区段、多种重链D区段和多种重链J区段，和

(2)使抗体产生细胞与增加抗体基因座体细胞超突变的试剂接触，和

任选的(3)通过基因改造在抗体产生细胞中引入多种抗体重链恒定区、多种抗体轻链可变区和/或多种抗体轻链恒定区的编码序列，

(4)在使细胞生产抗体的条件下培养多样型抗体产生细胞的细胞库，

(5)根据抗体的抗原特异性活性选择生产抗体的细胞，所述选择优选利用包含细胞克隆筛选技术、流式细胞仪或光电微流控技术的方法。