[发明专利]一种有机溶剂在体外合成可溶性直链淀粉中延长其聚合度的用途在审
| 申请号: | 202011312598.X | 申请日: | 2020-11-20 |
| 公开(公告)号: | CN114517216A | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
| 发明(设计)人: | 游淳;王娟 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12P19/18 |
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| 地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 有机溶剂 体外 合成 可溶性 直链 淀粉 延长 聚合 用途 | ||
1.一种有机溶剂在体外酶催化制备可溶性直链淀粉中延长其聚合的用途,其特征在于,以葡萄糖-1-磷酸为底物、麦芽四糖为引子,并在体系中加入二甲基亚砜(DMSO),通过α-淀粉磷酸化酶建立体外酶催化反应体系,进行酶催化反应。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶催化反应体系中还应加入缓冲液、镁离子。
3.如权利要求1或2任一所述的方法,其特征在于,所述酶催化反应体系中葡萄糖-1-磷酸的浓度为10-1000mM,进一步优选为50-500mM,更优选为50-300mM,最优选为200mM。
4.如权利要求1-3任一所述方法,其特征在于,所述酶催化反应体系中二甲基亚砜(DMSO)加入的比例为1%-50%(v/v),进一步优选为5%-20%(v/v),更优选为1%-50%(v/v),最优选为10%(v/v)。
5.如权利要求1-4任一所述方法,其特征在于,所述酶催化反应体系中α-淀粉磷酸化酶的用量为1-20U/mL,进一步优选为2-20U/mL,更优选为5-10U/mL,最优选为10U/mL。
6.如权利要求1-5所述的方法,其特征在于,所述酶促反应体系的反应温度为10-95℃,进一步优选为20-80℃,更优选为30-60℃,最优选为50℃。
7.如权利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述酶催化反应体系的反应时间为0.5-150小时,进一步优选为1-90小时,更优选为12-60小时,最优选为48小时。
8.如权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,α-淀粉磷酸化酶来源于柯达热球菌(Thermococcus kodakarensis)、大麦(Barly)、海栖热袍菌(Thermotoga maritima)、热纤维梭菌(Clostridium thermocellum)、嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)、大肠杆菌(Escherichia coli)等,或其氨基酸序列与上述来源的淀粉磷酸化酶具有至少60%,优选至少80%,更优选至少90%,最优选至少95%的同一性;优选地,α-淀粉磷酸化酶来源于柯达热球菌(Thermococcus kodakarensis),或其氨基酸序列与柯达热球菌(Thermococcuskodakarensis)的α-淀粉磷酸化酶具有至少60%,优选至少80%,更优选至少90%,最优选至少95%的同一性。
9.如权利要求1-8任一所述方法,其特征在于所述酶催化反应体系中有机溶剂的种类,除二甲基亚砜(DMSO)之外,还可以是二甲基酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)等有机溶剂。且各种二甲基酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)浓度均可用于本发明。
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