[发明专利]利用液态热响聚合物EO20

说明书

本发明涉及利用热响应型聚合物环氧乙烷‑环氧丙烷无规共聚物水溶液经温度诱导形成两水相分离纯化泰乐菌素。本发明通过将EO₂₀PO₈₀与泰乐菌素发酵液按照体积比1:5混合均匀，调节pH至9.0，并通过温度诱导形成两水相体系，使发酵液中的泰乐菌素转移并富集于下相EO₂₀PO₈₀中；通过将上相去除，并向其中加入与下相等体积的水，调节pH至4.5，通过温度诱导使泰乐菌素由下相EO₂₀PO₈₀转移并富集于上相水溶液中，利用正向萃取与反向萃取实现泰乐菌素的分离纯化，通过温度调节，热响应型聚合物的回收率达99.53％。

技术领域

本发明涉及两水相萃取技术领域，更具体地，涉及可再生型两水相萃取技术领域，特别是指利用单一温敏聚合物构建可回收型两水相体系在泰乐菌素分离纯化过程中的工艺设计与优化。

背景技术

可再生两水相体系是利用响应型聚合物构建两水相体系，通过将响应型聚合物的高效回收，实现两水相体系的重复再利用。

环氧乙烷(EO)-环氧丙烷(PO)无规共聚物(EOPO)是一种热响应型聚合物，可根据环氧乙烷与环氧丙烷的比例，调节其亲疏水性合成不同浊点的热响应型聚合物，其中常用包括EO₂₀PO₈₀、EO₃₀PO₇₀、EO₅₀PO₅₀，并可根据分离目标物质的性质选择合适浊点的 EOPO。EOPO水溶液通过温度诱导可形成两水相体系，当温度升高至其浊点上15℃，可形成上、下界面清晰的两相，而当温度低于其浊点时，该水溶液为均一溶液，无法形成两相。两水相体系可通过对温敏型聚合物的回收实现该体系的回收再利用。

可再生两水相体系其含水量高，聚合物可被高效回收，与传统的有机溶剂萃取相比，该萃取条件温和，有效避免产品活性的损失。可再生型两水相体系具有绿色环保、操作安全且不需要进行防火防爆的特点。利用该双水相体系具有分配系数高，易实现绿色环保分离纯化泰乐菌素。

可再生型两水相萃取技术在产品方面具有独特优势与较好的应用前景，但形成可再生型两水相体系的响应型聚合物合成方法较为复杂，价格昂贵且不利于工业放大，两种响应型聚合物成相面临相分离时间过长，且工艺不够成熟目前只停留在小试阶段，这极大限制了可再生型两水相体系的发展。

因此，利用单一热响应型聚合物构建可再生两水相体系可快速成相，目标物质在该体系中的分配系数高且该热响应型聚合物可被高效回收，利用绿色环保的方法分离纯化抗生素成为本领域亟待解决的问题。

发明内容

本发明主要针对上面的问题，提供了一种热响应型可再生两水相体系分离纯化泰乐菌素的方法，该两水相体系为热响应型，该聚合物为热响应型液态聚合物，相较于固态聚合物，该液态聚合物通过改变溶液温度可被高效回收，且易于分相、成相时间短，并可显著降低抗生素分离纯化成本，易于实现绿色环保分离抗生素的目标且该技术易于工业放大。

为了实现上述的目的，本发明提供了一种利用液态热响聚合物EO₂₀PO₈₀分离纯化泰乐菌素的方法，其特点是，所述的方法包括：

正向萃取步骤：将EO₂₀PO₈₀与泰乐菌素发酵液按照1:5的体积比混合均匀，并调节pH 至9.0，静置于55℃水浴锅，直至分成上下界面清晰的两相，取出离心，发酵液中泰乐菌素经过正向萃取分配并富集于下相中，去除上相萃余液；

反向萃取步骤：加入与下相萃余液相等体积的水，混合均匀，并调节pH至4.5，静置于45℃水浴锅，直至形成上下界面清晰的两相，经过反向萃取，泰乐菌素富集于上相水溶液中。

较佳地，反向萃取后的下相在50℃的条件下加热30分钟，除去上层水相，回收热响应型聚合物EO₂₀PO₈₀。