[发明专利]一种柱状黄杆菌分离培养基

说明书

本发明提供了一种柱状黄杆菌分离培养基，包括下列成份：无机盐0.5‑1g/L、除菌剂200‑500μg/mL、蛋白胨4‑5g/L、0.1‑1％的血清、凝胶粉15‑18g/L，所述无机盐由乙酸钠、二水氯化钡、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、七水硫酸亚铁、碳酸氢钠中的一种或多种组成，所述除菌剂由多粘菌素、妥布霉素、达托霉素、万古霉素中的一种或多种组成。本发明相对于现有技术，通过无机盐配合除菌剂，可迅速从柱状黄杆菌烂鳃病病鱼鳃和体表分离得到柱状黄杆菌，形成单菌落，杂菌数量少，通过实际应用，完成了全国11个省份草鱼柱状黄杆菌的流行病学调查，通过实际应用，完成全国11个省份草鱼柱状黄杆菌流行病学调查，在46个典型症状病灶部位分离出45株柱状黄杆菌。

技术领域

本发明涉及一种分离培养基，特别是涉及一种柱状黄杆菌分离培养基。

背景技术

草鱼是我国淡水养殖的主要品种，占淡水养殖产量25％以上，2018年我国草鱼的养殖产量约534万吨，每年由病害造成损失近21亿元。柱状黄杆菌属革兰氏阴性菌，感染包括草鱼、清鱼、鲫鱼、鳜鱼、鮰鱼、鲈鱼等海淡水鱼类近20多科。由柱状黄干菌引起草鱼烂鳃病近些年全国范围内均有爆发，是草鱼养殖中最严重的“老三病”之一。随着国家对水产抗生素使用监管趋于严格，具有预防性、安全性特征的水产细菌疫苗近年愈发受到国家和科研单位重视。

草鱼柱状黄杆菌分离和流行病学调查作为其疫苗研发的关键因素之一，利用传统的柱状黄杆菌分离方法，具有特异性差，分离率低的缺点，通过实际应用，完成了全国11个省份草鱼柱状黄杆菌的流行病学调查，在46个有典型症状病灶部位分离出45株柱状黄杆菌。

发明内容

本发明提供了一种柱状黄杆菌分离培养基，以提高柱状黄杆菌的分离效果。

本发明提供了一种柱状黄杆菌分离培养基，包括下列成份：无机盐0.5-1g/L、除菌剂100-500μg/mL、蛋白胨4-5g/L、0.1-1％的血清、凝胶粉15-18g/L，所述无机盐由乙酸钠、二水氯化钡、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、七水硫酸亚铁、碳酸氢钠中的一种或多种组成，所述除菌剂由多粘菌素、妥布霉素、达托霉素、万古霉素中的一种或多种组成。

进一步地，所述无机盐由乙酸钠、二水氯化钡、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、七水硫酸亚铁、碳酸氢钠组成。

更进一步地，所述无机盐包括：乙酸钠0.02g/L，二水氯化钡0.01g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.05g/L，七水硫酸镁0.6g/L，二水氯化钙0.0067g/L，七水硫酸亚铁0.002g/L，碳酸氢钠0.05g/L。

进一步地，所述柱状黄杆菌分离培养基还包括酵母提取物0.4-0.5g/L。

进一步地，所述血清含量为0.1％-0.6％。

更进一步地，所述血清含量为0.6％。

进一步地，所述除菌剂由多粘菌素、妥布霉素、达托霉素、万古霉素组成。

更进一步地，所述除菌剂包括多粘菌素140-200U/mL、妥布霉素2-5μg/mL、达托霉素100-200μg/mL、万古霉素2-10μg/mL。

进一步地，所述凝胶粉为琼脂粉。

进一步地，所述蛋白胨为胰蛋白胨。

本发明相对于现有技术，通过无机盐配合除菌剂，可以迅速从柱状黄杆菌烂鳃病病鱼鳃和体表分离得到柱状黄杆菌，形成单菌落，杂菌数量少，相比传统的分离方法，解决杂菌数量较多的问题，大大提高了其分离效率，突破了柱状黄杆菌难以分离瓶颈，，通过实际应用，完成了全国11个省份草鱼柱状黄杆菌的流行病学调查，在46个有典型症状病灶部位分离出45株柱状黄杆菌。

附图说明