[发明专利]一种检测噻虫胺的试纸条及其应用

说明书

本发明公开了一种检测噻虫胺的试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有噻虫胺半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有噻虫胺单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述噻虫胺试纸条检测农作物中噻虫胺残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。

技术领域

本发明涉及一种检测噻虫胺的试纸条及其应用，具体涉及一种用于检测噻虫胺的胶体金试纸条，其特别适用于农作物中噻虫胺残留的检测。

背景技术

噻虫胺是新烟碱类中的一种杀虫剂，是一类高效安全、高选择性的新型杀虫剂，其作用与烟碱乙酰胆碱受体类似，具有触杀、胃毒和内吸活性。主要用于水稻、蔬菜、果树及其他作物上防治蚜虫、叶蝉、蓟马、飞虱等半翅目、鞘翅目、双翅目和某些鳞翅目类害虫的杀虫剂，具有高效、广谱、用量少、毒性低、药效持效期长、对作物无药害、使用安全、与常规农药无交互抗性等优点，有卓越的内吸和渗透作用，是替代高毒有机磷农药的又一品种。其结构新颖、特殊，性能与传统烟碱类杀虫剂相比更为优异，有可能成为世界性的大型杀虫剂品种。

检测噻虫胺的方法有高效液相色谱-串联质谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱法等。与上述方法相比，免疫化学检测法对药物检测具有快速、特异、灵敏、准确、可以批量监测、样品处理简单、能实现自动化操作等优点。而免疫化学法检测噻虫胺的前提是需要具备针对噻虫胺的抗体，本申请发明了噻虫胺人工抗原制备方法，并将其应用于快速检测试纸条中，用时短，操作简单，成本较低，适用于基层单位大批量地检测样品。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的噻虫胺残留检测试纸条。

本发明所提供的检测噻虫胺残留的试纸条，包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)；所述反应膜上具有包被有噻虫胺半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有噻虫胺单克隆抗体-胶体金标记物。

所述噻虫胺半抗原-载体蛋白偶联物是由噻虫胺半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。

所述噻虫胺单克隆抗体是以噻虫胺半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，是由噻虫胺单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。

所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上，所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；所述结合物释放垫可为玻璃棉或聚酯材料；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备喷涂有噻虫胺单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备具有包被有噻虫胺半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

具体地说，步骤包括：

1)半抗原制备：将噻虫胺与氨基丁酸等物质经过一系列化学反应得到噻虫胺半抗原；

2)将噻虫胺半抗原与载体蛋白偶联，得到噻虫胺半抗原-载体蛋白偶联物；