[发明专利]一种多通道灌流培养细胞的方法在审
| 申请号: | 202011283099.2 | 申请日: | 2020-11-17 |
| 公开(公告)号: | CN112430541A | 公开(公告)日: | 2021-03-02 |
| 发明(设计)人: | 陈皓;杨开琳;帅进文 | 申请(专利权)人: | 英诺维尔智能科技(苏州)有限公司 |
| 主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/36;C12M1/34;C12M1/26;C12M1/12;C12M1/04;C12M1/02;C12M1/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 通道 灌流 培养 细胞 方法 | ||
1.一种多通道灌流培养细胞的方法,其具体步骤如下:
S1,培养基加注:F1,F2,F3,F3,F4,F5,F6,F7,F8,为装有培养基的培养袋,WS1,WS2,WS3,WS4,WS5,WS6,WS7,WS8称重传感器,培养基通过蠕动泵P1泵入到加热模块H1,再进入到离心模块C罐内,再经过蠕动泵P3泵入到培养罐内,完成培养基的加注;
S2,细胞加注:通过注射器刺入培养罐加注口完成细胞液的加注;
S3,主回路循环:通过两个电机带动四个蠕动泵头驱动,即两个单电机双泵头驱动,让培养罐内的液体实现灌流;主循环采用四通道灌流培养,其中一路经过氧合器即膜式气体交换单元;氧气与二氧化碳经过气动二联件,再经过质量流量控制器,经过空气过滤器进入到氧合器G,溶入到培养液中进入培养罐内,给细胞提供充足的溶氧及二氧化碳;培养罐内部有PH及溶氧传感器贴片,PH与溶氧传感器探头在培养罐外部,无直接接触培养液进行检测培养罐内部的PH及溶氧;当PH偏高时,PID会控制质量流量控制器往培养罐内注入定量的二氧化碳,形成碳酸调节PH;当PH偏低时,会通过蠕动泵P5将F7袋内的PH值调节液体入到培养罐内实现调节PH;
S4,取样模块:通过蠕动泵P4将细胞液从培养罐内泵出,完成取样,取样之前,针头一直泡在酒精清洗容器内部,取样后用真空泵VP将取样后的废液泵入到废液袋F8,F8上部有称重传感器WS8,当重量达到设定值时,会报警提醒工作人员换废液袋;
S5,上清收集:通过蠕动泵P3将培养液泵入到离心模块C内,电机带动离心罐高速运动行,通过离心运动将细胞与上清液分离,蠕动泵将上清泵入到上清收集袋F2内;
S6,细胞收集:通过蠕动泵P3将培养液泵入到离心模块C内,电机带动离心罐高速运动行,通过离心运动将细胞与上清液分离,蠕动泵将上清泵入到上清收集袋F2内。
2.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S1中F1,F2,F3,F3,F4,F5,F6,F7,F8,为装有培养基的培养袋分别与一一对应对悬挂在WS1,WS2,WS3,WS4,WS5,WS6,WS7,WS8称重传感器的下方,S2中培养罐上方设置有细胞加注口并且细胞加注口设置有肝素帽。
3.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S1中所述培养基通过硅胶管连接在加热模块H1,所述加热模块H1通过硅胶管连接在蠕动泵P1的进液端,所述蠕动泵P1的出液端通过硅胶管连接在离心模块C罐上,所述离心模块C罐通过硅胶管连接在蠕动泵P3的进液端上,所述蠕动泵P3的出液端通过硅胶管连接在培养罐上。
4.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S3中培养罐通过硅胶管连接在氧合器上,所述氧气与二氧化碳经过气动二联件通过硅胶管连接在质量流量控制器,所述质量流量控制器通过管道连接在空气过滤器上,所述空气过滤器通过管道连接在氧合器G上,所述氧合器G通过硅胶管连接在培养罐上。
5.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S4中蠕动泵P4通过硅胶管连接在培养罐,所述真空泵VP通过硅胶管连接在废液袋F8上。
6.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S5中蠕动泵P3通过硅胶管连接在培养液上,蠕动泵通过硅胶管连接在收集袋F2上。
7.根据权利要求1所述的一种多通道灌流培养细胞的方法,其特征在于:所述S5中通过蠕动泵P2通过硅胶管连接在细胞液收集袋F2上。
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