[发明专利]测定超敏肌钙蛋白T含量的磁微粒化学发光检测试剂盒

说明书

本发明为一种测定超敏肌钙蛋白T含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：R1试剂、R2试剂、磁分离试剂、校准品液系列和化学发光底物液；所述R1试剂为缓冲液，所述磁分离试剂为肌钙蛋白T单克隆抗体包被的磁微粒溶解在磁分离试剂的稀释液中配制成的肌钙蛋白T单克隆抗体包被的磁微粒溶液，R2试剂为碱性磷酸酶标记的肌钙蛋白T单克隆抗体溶解在R2试剂的稀释液中配制成的碱性磷酸酶标记的肌钙蛋白T单克隆抗体溶液，化学发光底物液为碱性磷酸酶催化发光的化学发光底物液。本发明为临床检测人血清中的肌钙蛋白T提供了一种更准确、精确、方便、快捷和简单的方法。

技术领域

本发明涉及医用诊断试剂领域，特别是涉及一种采用磁微粒化学发光技术和抗原-抗体结合技术检测超敏肌钙蛋白T含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。

背景技术

肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白C(TnC)。肌钙蛋白放松了肌动球蛋白，让肌动球蛋白与肌浆球蛋白互起作用，而造成肌肉收缩。心肌中的T和I亚基结构不同于其他肌肉组织，心肌钙蛋白T、I(cTnT、cTnI)由于分子量小，所以发病后血中浓度迅速升高。cTnT是横纹肌分子结构中的多肽链，相对分子质量37×10³，在人的心脏有4种肌钙蛋白T异构体。以两种形式存在：游离形式存在于胞浆中，占6％～8％，结合形式存在于心肌收缩单位的细肌丝上，占92％～98％。因cTnT与骨骼肌TnT的基因编码不同，骨骼肌中无cTnT的表达。cTnT相对于两种骨骼肌亚型有40％的不同源性。cTnT分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。

5％-8％的cTnT分布于心肌细胞胞浆，为游离的胞浆蛋白，92％～95％结合于细肌丝中，为结合的结构蛋白；3％的cTnI分布于心肌细胞胞浆中，97％与心肌结构蛋白结合。当心肌细胞因缺血缺氧等因素遭破坏时，游离型cTnI和cTnT可首先迅速从细胞中释放入血，随后结合于心肌结构蛋白中的结合型cTnI和cTnT逐渐分解，缓慢释放入循环血中，从而解释了以心肌细胞受损为表现的疾病，如急性心肌梗死(AMI)，cTnI和cTnT在循环血中较早出现并能持续较长时间的原因。高水平的超敏cTnT能很好的多因素分析预测所有心脏病死亡率。cTnT能提高AMI血清学检测有效性。

cTnT检测可用于急性冠状动脉综合症坏死的辅助诊断，如急性心肌梗死。同时也是急性冠状动脉综合症病人的危险分层和慢性肾功能衰竭病人的心肌危险性的指标。另外，还可以选择对心肌肌钙蛋白T增高更有效的治疗和干预方法。

肌钙蛋白T(troponin，TnT)具有高度的心肌特异性和灵敏度，是心肌坏死的标志物，一般在心肌梗死、心肌炎、心包炎等患者血液中有所升高，并且其值越高，患者预后越差。

目前已知的肌钙蛋白T检测方法主要有RIA(radioimmunoassay放射免疫测定法)法、酶联免疫法(ELISA)、胶体金免疫层析法(GICA)和化学发光免疫分析法(CLIA)等。但是，这些方法都存在一定的缺陷，RIA法污染大，已逐渐退出临床检验领域；ELISA法自动化程度低且操作复杂繁琐，灵敏度低、线性范围窄等缺点；GICA具有操作简单，检测速度快等优点，但也存在灵敏度低、试剂不稳定、重复性较差、难以进行定量等缺点；CLIA法是在酶联免疫分析法基础上发展起来的一种免疫检测技术，具有灵敏度高、检测线性范围宽、操作简单，自动化程度高等优势。目前化学发光免疫分析技术因其有上述诸多优点得到了广泛的应用，但现有技术中的化学发光免疫分析试剂盒多为进口的封闭式全自动化学发光检测系统，需要昂贵的全自动化学发光检测仪，从而限制了推广使用。

因此，目前尚需一种污染小、灵敏度高、操作简单、自动化程度高、特异性好、成本低的肌钙蛋白T检测试剂盒和使用方法。

发明内容

本发明旨在开发一种灵敏度高、无污染、操作简单、特异性好并且成本低廉的一种测定超敏肌钙蛋白T含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。