[发明专利]一种用于降解啶虫脒、吡虫啉、氧化乐果农药残留的微生物菌剂及其制备方法在审
| 申请号: | 202011262747.6 | 申请日: | 2020-11-12 |
| 公开(公告)号: | CN112322538A | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
| 发明(设计)人: | 何微;岳苑;贾冰凝;马桂娟;朱捷;杨建兴;吴明;汪洪 | 申请(专利权)人: | 宁夏回族自治区食品检测研究院 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N11/14;B09C1/10;A62D3/02;C05F11/08;C12R1/085;C12R1/11;C12R1/07;A62D101/04;A62D101/45 |
| 代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 张学府 |
| 地址: | 750011 宁夏回族自治区银川*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 降解 啶虫脒 吡虫啉 氧化 乐果 农药 残留 微生物 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于降解啶虫脒、吡虫啉、氧化乐果农药残留的微生物菌剂,其特征在于:所述微生物菌剂的组成及其质量百分比为:微生物菌27-35%,腐殖酸30%,牛肉膏30-40%,助剂1-2%。
2.根据权利要求1所述的一种用于降解啶虫脒、吡虫啉、氧化乐果农药残留的微生物菌剂,其特征在于:所述微生物菌包括蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌以及短小芽孢杆菌;这三株菌均是从宁夏枸杞种植地土壤中筛选出的优势菌株。
3.根据权利要求1所述的一种用于降解啶虫脒、吡虫啉、氧化乐果农药残留的微生物菌剂,其特征在于:所述微生物菌的每一种有效菌的活菌数≥3亿/g,有机质含量≥35%。
4.根据权利要求1所述的一种用于降解啶虫脒、吡虫啉、氧化乐果农药残留的微生物菌剂,其特征在于:所述助剂包括腐殖酸钠、黄腐酸钾、磷酸二氢钾和硫酸铵。
5.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法,其特征在于:所述微生物菌剂的制备方法包括如下步骤:
(1)菌种活化:将从所述土壤中筛选出并经过农药耐受实验驯化的低温保存的所述蜡样芽孢杆菌、所述短小芽孢杆菌与所述短小芽孢杆菌菌株分别接种于营养琼脂培养基上,36℃恒温条件下培养24-36h;
(2)一级种子液的制备:配制LB液体培养基,分装于500mL三角瓶中,每瓶装液量为200mL,将分装好的所述培养基高压灭菌后接入活化好的所述蜡样芽孢杆菌、所述巨大芽孢杆菌与所述短小芽孢杆菌,培养时间36℃,转速为240rpm/min摇床培养20-24h;
(3)二级种子液的制备:配制种子罐培养基,将步骤(2)得到的所述一级种子液,按3-5%的接种量分别接入500L种子罐,温度36℃,转速240rpm/min,通气量0.8V/V·min条件下培养24h;
(4)大规模工业发酵培养:将步骤(3)得到的所述二级种子液,按大规模工业发酵罐所用培养基体积比的5-10%接种量分别接入所述大规模工业发酵罐,所述温度36℃,所述转速240rpm/min,所述通气量0.8V/V·min条件下培养26h,完成发酵,得到蜡样芽孢杆菌发酵液、巨大芽孢杆菌发酵液以及短小芽孢杆菌发酵液;
(5)微生物菌的制备:将步骤(4)得到的所述蜡样芽孢杆菌发酵液、所述巨大芽孢杆菌发酵液以及所述短小芽孢杆菌发酵液,按所述发酵罐干物质重量比为1:1添加硅藻土进行吸附,然后进行压滤、浓缩、干燥;
(6)所述微生物菌含菌量的检测:采用稀释平板法检测干燥后滤饼的含菌量;
(7)所述微生物菌剂的制备:按质量百分比,将步骤(5)得到的所述蜡样芽孢杆菌菌剂、所述巨大芽孢杆菌菌剂以及所述短小芽孢杆菌菌剂按比例加入所述硅藻土稀释至芽孢浓度≥60亿个/g,然后与所述腐殖酸30%,所述牛肉膏30-40%,以及所述助剂1-2%混合均匀,混合后的物料加入气流粉碎机,细度控制300-350目,粉碎后得到所述微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的微生物菌剂制备方法,其特征在于:步骤(5)中所述压滤采用板框压滤机,所述干燥采用沸腾干燥床,所述干燥温度为70-80℃。
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