[发明专利]免疫状态评估方法及应用

说明书

本发明涉及一种免疫状态评估方法及应用，属于免疫评价技术领域。该方法包括：免疫组库分析：提取待评估目标样本基因组，构建免疫组库文库；进行高通量测序，分析TCR和/或BCR的克隆多样性，获得免疫组库指标值；免疫功能分析：取待评估目标血液样本，分为对照和刺激样本，取刺激样本加入刺激物，使刺激样本中免疫细胞产生免疫应答反应，检测免疫组分在刺激前后表达差异，分析得到免疫功能得分；数据分析：综合免疫组库分析结果和免疫功能分析结果，获得免疫年龄，根据免疫年龄、免疫功能得分和免疫组库指标值中的至少一种，获得待评估目标的免疫状态。该方法结合高通量免疫组库测序技术和免疫功能检测两种方法，从不同层面全面综合评估免疫状态。

技术领域

本发明涉及免疫评价技术领域，特别是涉及一种免疫状态评估方法及应用。

背景技术

人类无时无刻无处不处于微生物的包围之中，微生物无处不在。当某种传染病流行时，会感染一部分人，有时还会扩散开来，形成一种流行的趋势。然而，并不是所有的人都会被感染，有的人即使感染也不发病，反映出这部分人机体形成了抗御外来物质的能力，称为免疫状态。

免疫系统是机体担负免疫功能的物质基础，包括免疫器官、免疫细胞及免疫分子三部分。其主要功能是防御、监视、清除，分为非特异性免疫和特异性免疫两大类。免疫系统具有两面性，正常工作的免疫系统可保持机体各方面功能的健康运行，而当免疫系统受损或失控时，机体的免疫状态降低，易使人患病。所以免疫平衡很重要，如何精准科学的评估免疫状态是一项重要的技术。

传统的免疫学检测方法评估免疫状态强弱的有：①免疫五项，即免疫功能的检测。检测血液中免疫球蛋白和补体的含量。②血常规，利用细胞计数的方法分析外周血中白细胞的数量，白细胞数量的增高表明体内存在炎症反应。③自身抗体检测，用酶联免疫法或免疫荧光法等检测抗体的阳性率，不同抗体的阳性率与各种自身免疫性疾病的发生相关。④感染免疫检测，即针对特定细菌、病毒相关的一类抗体检测。⑤通过饮食、生活习惯、心理健康等影响免疫功能的因素间接评估免疫状态。目前，部分医院及第三方检测机构，大多通过流式细胞仪分选，可以了解各类免疫细胞群体的数量和比例。然而，传统的免疫学检测方法存在一定的局限性，均无法全面评估免疫状态。

近年来，利用免疫组库高通量测序技术从分子水平研究免疫与健康疾病的方法也被广泛应用。免疫组库(Immune Repertoire，IR)被定义为在任何特定时间下，机体适应性免疫系统的T淋巴细胞表面受体(T cell receptor，TCR)和B淋巴细胞表面受体(B cellreceptor，BCR)的总和。在T/B细胞成熟过程中，会发生VDJ基因的重排，在重排过程中随机选取一种V、D和J基因串联在一起，组成TCR/BCR的可变区，同时还会在接合部位发生碱基的随机的插入和删除，因此几乎每个新产生的T/B细胞的TCR/BCR基因都各不相同，组成数量庞大的TCR/BCR免疫组库，赋予机体识别各种不同抗原的能力。而通过高通量测序对TCR/BCR的编码基因进行分析，可以对免疫组库进行解码，用于对免疫系统的多样性和特异性进行分析。

随年龄的增长，淋巴细胞多样性下降，导致免疫功能下降。过多的内外部环境压力及疾病会导致免疫系统过多过早的消耗，造成免疫多样性明显低于同龄人。

因此，亟需一种能够精准评估免疫状态的方法，在充分了解免疫状态的基础上，可更为精准的找到维持免疫系统的正常运转的方式，才能更好的抵御疾病的发生。

发明内容

基于此，有必要针对上述问题，提供一种用于非诊断治疗目的的免疫状态评估方法，从免疫应答功能与抗原识别能力检测相结合出发，全面评估个体抵抗疾病的能力。

一种用于非诊断治疗目的的免疫状态评估方法，包括：

免疫组库分析：取待评估目标的生物样本，提取其中基因组DNA或RNA，构建免疫组库文库；进行高通量测序，分析TCR和/或BCR的克隆多样性，获得免疫组库指标值；