[发明专利]地塞米松的高效液相检测方法

说明书

本发明公开一种地塞米松的高效液相检测方法，其采用反相C18色谱柱、DAD检测器，流动相A是三氟乙酸的水溶液，流动相B是三氟乙酸的乙腈溶液，采用梯度洗脱。采用本发明的方法进样3～5uL，能够有效检出地塞米松及其有关物质，并且分离度R能达1.5以上，HPLC谱基线平稳，不发生漂移；本方法检测时间短，只需3min即可完成高效液相检测过程，大大降低了样品耗量，同时提高了检测效率，适合高通量筛选；能节省溶剂，降低成本；本发明的方法用于地塞米松的含量测定，具有良好的线性关系，重现性高，在原料药、制剂质量研究以及相关药动学定量研究等方面具有重要研究价值。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种地塞米松的高效液相检测方法。

背景技术

地塞米松是一种人工合成的皮质类激素，于1957年首次合成，并列名于世界卫生组织基本药物标准清单之中，为基础公共体系必备药物之一。与其他糖皮质激素一样，具有抗炎、抗内毒素、抑制免疫、抑制免疫、抗休克及增强应激反应等药理作用，故广泛应用于各科治疗多种疾病，如自身免疫性疾病，过敏，炎症，哮喘及皮肤科、眼科疾病。地塞米松磷酸钠注射剂更是抢救垂危病人不可缺少的急救药品，近十几年来，临床医师应用地塞米松磷酸钠治疗和预防各类中西药引起的药物过敏及治疗病毒性感冒引起的发烧等症，使地塞米松临床用药量逐年增加，中国已成为世界最大的地塞米松市场。

地塞米松应用范围广，作用强，疗效明显，但长期使用或较大剂量使用会出现物质代谢和水盐代谢紊乱，易引起糖尿病、骨质疏松、消化道溃疡和类库欣综合症状，对下丘脑-垂体-肾上腺轴抑制作用较强。并发感染为其主要的不良反应。现有技术中多是检测醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠的形式，直接检测地塞米松原形的报道较少。

陈冬梅等人在“猪可食性组织中地塞米松残留检测方法-高效液相色谱法”中报道采用ODsc色谱柱，紫外检测器，乙睛：水(50：50，v/v)为流动相，240nm紫外波长检测，标准曲线的线性范围为5～640μg/L。该方法的出峰时间晚，线性范围定量下限偏高(5μg/L)，不合适低含量样品的定量检测。

周佳等人在“同时检测畜禽肉中呋喃唑酮、地塞米松残留高效液相色谱法的建立”中报道了用色谱柱Welch Materials XB-C18(250mm×4.6mm，5μm)，流动相乙腈：水＝40:60，流速1.0ml/min，柱温35℃，检测波长240nm，标准曲线线性范围为5～400μg/L。该方法的地塞米松在约9min出峰，不合适高通量样品的检测；定量下限偏高(5μg/L)，不合适低含量样品的检测。

可见，关于地塞米松的定量检测，现有方法的检测时间偏长，标准曲线的定量下限偏高。本发明针对现有技术中的检测方法进行了改进与优化，希望克服上述问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测时间短、分离效果好、定量下限低、精确度和准确度高的地塞米松的高效液相检测方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的地塞米松的高效液相检测方法，其中，

色谱柱采用反相C18色谱柱；

检测器采用DAD检测器；

流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是三氟乙酸的水溶液，水溶液中三氟乙酸体积浓度为0.05～0.2％，流动相B是三氟乙酸的乙腈溶液，乙腈溶液中三氟乙酸体积浓度为0.05～0.2％。

采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：流动相A+流动相B＝100％，0～0.01min，流动相B保持体积百分比为20％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由20％递增至90％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由90％递减至20％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为20％。

在一个优选的实施例中，流动相A是三氟乙酸的水溶液，流动相B是三氟乙酸的乙腈溶液。