[发明专利]一种稻瘟病病菌孢子分离和保存智能系统及方法

说明书

本发明属于稻瘟病菌孢子的分离技术领域，公开了一种稻瘟病病菌孢子分离和保存智能系统及方法，进行病圃的设置、病菌采样和保存；将稻瘟病标本放置含有抗生素利福平2ml的无菌水中，浸泡10h～24h，取出后放置在灭菌标本支架上；于标本支架下放入两张浸有抗生素无菌水滤纸的培养皿，保湿培养48h～72h；将经保湿培养的标本利用震落法将孢子震落到灭菌水琼脂培养基中；将含有孢子的水琼脂培养皿放入26℃恒温培养箱，培养16h～20h；并进行接种体准备；进行鉴别寄主培育；并将接种体接种于培育好的寄主上。本发明解决了现有技术中稻瘟病病菌孢子分离和保存智能效果差，缺乏实用性的问题。

技术领域

本发明属于稻瘟病菌孢子的分离技术领域，尤其涉及一种稻瘟病病菌孢子分离和保存智能系统及方法。

背景技术

目前，稻瘟病由稻梨孢真菌引起的一种水稻病害，又称稻热病、火烧瘟、叩头瘟。病菌侵染叶片、茎秆、穗颈、小穗梗和谷粒。根据受害时期和侵染部位不同，可分别引起苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟和粒瘟。水稻稻瘟病是一种重要真菌病害,是影响水稻高产、稳产的重要病害之一。近年来，随着抗病品种的推广，病害得到了有效的控制，但随着抗病品种种植年限的延长,其抗性就被克服，造成病害流行，主要是由于稻瘟病菌群体内小种或致病性的变化所致。一个抗病新品种的抗性的逐渐丧失与该地区稻瘟病菌小种的组成和变异有关,小种的生存和占优势取决于可作用的寄主品种。近年来我区培育了一批优质、高产水稻品种，实现了品种的六次更新换代，每一次品种更新都使水稻产量和品质大幅度提升，但随着品种大面积推广种，新的优势小种产生而导致其抗病性逐年丧失，影响了新品种应用年限。2010-2012年对全区采集的稻瘟病样进行了分离、培养，筛选出17个宁夏稻瘟病菌代表菌系，对宁夏主栽品种、高代稳定材料和预审品系进行抗性鉴定，通过对育种资源和育成品种抗性研究，获得了一批抗源材料和抗性品种，部分材料已作为杂交亲本使用。但对宁夏水稻品种的抗瘟性和抗谱的分析还未深入进行研究。

本项目拟通过对宁夏水稻主栽地区的稻瘟病采集标样进行分离，从中获取有效单孢菌株，分离鉴定出不同地区的生理小种的种类、毒力，筛选出本区主要致病生理小种，探明我区稻瘟病菌生理小种组成及其分布,同时将宁夏水稻稻瘟病病菌的不同类型不同小种进行提纯分类并保存，以便应对随着不同年份生理小种的变异。筛选广谱性稻瘟病抗源，为抗性基因的科学利用、抗病品种的合理布局及病害的可持续控制提供理论依据。

稻瘟病孢子，稻瘟病菌丝产生的生殖细胞,它不需和其他细胞结合即可发育成新的个体。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)现有技术中，稻瘟病病菌孢子分离和保存智能效果差，缺乏实用性。

(2)宁夏在稻瘟病方面先后开展了许多研究。1984年宁夏农学院穆永顺教授对宁夏灌区稻瘟病流行趋势作了分析研究。1995年，由于稻瘟病大发生，宁夏多个主栽品种先后因稻瘟病的大发生而遭受淘汰，其中以新育成高产品种“宁粳9号”也在其中。为此，1994-1995年开展了本区主栽水稻品种稻瘟病发生情况的普查工作，并从采集标样中获取有效单孢菌株104个，分离鉴定出本区生理小种有47个，主要致病生理小种有7个，对宁夏稻瘟病致病性变异进行了分析研究，取得了可喜的成绩，但对宁夏水稻品种的抗瘟性和抗谱的分析未能深入系统研究。稻瘟病生理小种的监测对制定抗病育种策略，病害预测预防以及水稻品种的合理布局具有重大的意义。目前利用全国统一的鉴别寄主，按照统一方法对病菌生理小种进行监测是切实可行的，可是由于水稻品种的更换，稻瘟病致病性的变异，仅靠我国的70年代筛选的7个鉴别寄主远不能辨别潜在的致病小种的上升动态，所以必须在利用7个鉴别寄主的同时增加新推广的品种作为辅助鉴别品种，这样对潜在的致病小种的检测结果会更准确。