[发明专利]一种检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法

权利要求书

1.一种检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)配制标准品溶液：首先制备标准储备液，称取适量的地塞米松标准品，用甲醇配制成浓度为10μg/L的标准储备液，于-18℃冰箱中保存；然后将标准储备液用甲醇配制成浓度为1000μg/mL的混合标准工作液，于4℃冰箱中保存；

制作标准曲线时将标准工作液用空白基质溶液配制成浓度分别为1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、15ng/mL、20ng/mL的标准品溶液备用；

(2)待测样品前处理：

A.提取：称取牛奶或奶粉2.00g试样于50mL离心管中，回收过程中另加入1000ng/mL地塞米松标准溶液20μL，1％醋酸乙腈溶液15mL；涡旋混匀5min，超声提取15min，再涡旋混匀5min，在转速为4000r/min的离心机中离心5min；

B.净化：将上清液全部转移到准备好的净化管中，所述净化管中包括10g无水硫酸钠、0.5gC₁₈、0.2gPSA；涡旋混匀5min，转速为4000r/min离心机中离心5min；吸取7.5mL上清液于10mL离心管中，于40℃水浴中氮气吹干；

C.复溶：向吹干的离心管中加入0.5mL含0.1％甲酸的10％甲醇水，超声30S，涡旋混匀5min，过0.22um滤膜，待上机测试；

(3)将前处理好的样液用液相色谱-串联质谱仪定量分析，对待测样品进行定性和定量检测，得到牛奶和奶粉中地塞米松残留的含量。

2.根据权利要求1所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，步骤(3)具体如下：

A、将步骤(1)配制的不同浓度的地塞米松标准工作曲线，用液相色谱-串联质谱仪分析检测，进样体积为5.0μL，获得标准品溶液的总离子流图、定量离子色谱图和定性离子对色谱图；

B、取5.0μL待测样品溶液进样，用液相色谱-串联质谱仪分析检测，得到待测样品溶液的总离子流图、定量离子对色谱图和定性离子对色谱图；

C、以地塞米松的定量离子峰面积和浓度分别为横纵坐标，得到地塞米松标准工作曲线；

D、根据待测样品溶液中地塞米松残留的定量离子峰面积，结合标准曲线，计算得到待测样液中地塞米松的浓度C，并按以下公式计算得到牛奶和奶粉中地塞米松的含量X，含量计算公式为：

X＝C*V*1000*f/(m*1000)

其中X是待测样品中奶粉和牛奶地塞米松的含量，单位为μg/kg；C是待测样品中地塞米松残留的浓度，单位为ng/mL；V是待测样品最终溶解体积，单位为mL；m是待测样品质量，单位为g；f是稀释倍数。

3.根据权利要求1所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于所述液相色谱-串联质谱仪的色谱条件为：

a)色谱柱:Rapid Resolution HD 3.0X100mm1.8-Micron；

b)流动相及梯度：乙腈+0.1％甲酸5mM乙酸铵水溶液；

c)结束时间：5min；

d)流速：0.4mL/min；

e)柱温：30℃；

f)进样量：5μL。

4.根据权利要求3所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，所述乙腈和乙酸铵水溶液的体积比为(20～90)：(10～80)。

5.根据权利要求3所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体情况见下表：

6.根据权利要求3所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱联用仪检测时的质谱条件为：

离子化模式：电喷雾电离负离子模式；扫描方式：多反应监测(MRM)；喷射电压：4000V；Delta EM：200V；雾化器压力：40psi；干燥气流量：7L/min；干燥气温度：325℃。

7.根据权利要求1所述的检测牛奶和奶粉中地塞米松残留量的方法，其特征在于，在步骤(2)的提取过程中，对于含油脂较多的样品，除了添加1％醋酸乙腈溶液15mL外，还需要加入10mL正己烷，在步骤(2)的净化过程中，加入正己烷的样品需将正己烷除去。