[发明专利]一种新冠病毒总抗体酶联免疫检测试剂盒

说明书

本发明提供一种新冠病毒总抗体酶联免疫检测试剂盒，包括包被新冠病毒抗原的包被板，含有HRP标记鼠抗人轻链κ链抗体的酶结合物，系统反应液、阴阳性对照液和TMB底物液。可以快速、准确测定样品中新冠病毒抗体的是否存在，产品采用间接法检测总抗体，相比夹心法生产物料成本可以降低，而且标记工艺更加简洁。

技术领域

本发明涉及免疫学检测技术领域，尤其是涉及一种新冠病毒总抗体酶联免疫检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒是一大类病毒，引起的疾病从普通感冒到更严重的疾病，如中东呼吸综合征（MERS-CoV）和严重急性呼吸综合征（SARS-CoV）。感染的常见症状包括呼吸系统症状、发烧、咳嗽、呼吸急促和呼吸困难。在更严重的病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭甚至死亡。

被新冠病毒感染后，人体免疫系统会产生相对应的IgA、IgM、IgG抗体，通过外周血血清可以检测标志物是否存在，从而推断是否感染。血清学试验已成为检测新冠病毒感染的必要方法，它更容易操作，检测时间短，检测成本低。不同Ig类型会在感染后不同时间产生，且产生量也有较大差异，血清学检测呈阳性表明存在新冠病毒抗体，证实既有过去感染的可能，也有潜在的当前感染，总抗体作为第一步初筛更有价值。目前有双抗原夹心法检测总抗体的试剂产品，但是对抗原标记工艺要求较高，容易出现漏检。

天然Ig分子含有四条异源性多肽链，其中，分子量较大的两条链称为重链(heavychain，H)，而分子量较小的两条链称为轻链(Light chain，L)。重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同，其抗原性也不同。据此，可将Ig分为5类(class)，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。轻链可分为两种，分别为kappa(κ)链和lambda(λ)链。据此，可将lg分为两型(type)，即κ型和λ型。一个Ig分子上两条轻链的型别总是相同的。不同类Ig既存在κ型，也存在λ型。正常人血清Ig的κ：λ约为2：1。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种新冠病毒总抗体酶联免疫检测试剂盒，可以快速、准确测定样品中新冠病毒抗体的是否存在，产品采用间接法检测总抗体，相比夹心法生产物料成本可以降低，而且标记工艺更加简洁。

本发明的目的是以下述方式实现的：一种新冠病毒总抗体酶联免疫检测试剂盒，包括包被新冠病毒抗原的包被板，含有HRP标记鼠抗人轻链κ链抗体的酶结合物，系统反应液、阴阳性对照液和TMB底物液。

系统反应液中包括缓冲液、防腐剂、酪蛋白、溴甲酚紫、吐温20。

缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种。

酶结合物由HRP标记的鼠抗人轻链κ链抗体与酶结合物的稀释液按体积比1:（4800—5200）的比例混合得到。

酶结合物的稀释液包含有酪蛋白。

酶结合物的稀释液中还包括缓冲液、防腐剂，缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种。

酶结合物的稀释液中还包括保护蛋白，保护蛋白为小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一种。

阴阳性对照液包括阳性对照液和阴性对照液；阴性对照液包括缓冲液、防腐剂、保护蛋白和制霉菌素，缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种；保护蛋白为小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一种；阳性对照液为灭活新冠病毒抗体与阴性对照稀释液按体积比1:1000的比例混合得到。

检测试剂盒还包括洗液和终止液。

其作用原理如下：