[发明专利]一种调经养荣汤中多种有效成分的含量测定方法有效
申请号: | 202011200101.5 | 申请日: | 2020-11-02 |
公开(公告)号: | CN112362774B | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 周万辉;曾英姿;王冬梅;于洪亮;赵磊;程世娟 | 申请(专利权)人: | 山东沃华医药科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/34 |
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地址: | 261205 山东省潍坊*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 调经 养荣汤中 多种 有效成分 含量 测定 方法 | ||
1.一种调经养荣汤中多种有效成分的含量测定方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.对照品溶液的制备:
分别精密称取阿魏酸、藁本内酯、芍药苷、地黄苷D、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、延胡索乙素、丹皮酚、香附烯酮、α-香附酮、橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、羟基红花黄色素A标准品,溶解于溶剂中,得到混合对照品溶液;
S2.调经养荣汤供试品溶液的制备:
量取调经养荣汤适量,置于容量瓶中,加入适量甲醇,超声处理,放冷,用甲醇定容至刻度线,密塞摇匀,取适量离心,移取上清液至容量瓶中,加甲醇定容至刻度,混匀,即得供试品溶液;
S3.含量测定:
采用高效液相色谱法,在相同的检测条件下分别获得对照品溶液和供试品溶液的色谱图;并根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积,计算调经养荣汤供试品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量;
所述检测条件包括:
色谱柱C18、流速0.8-1.2mL/min;柱温20-40℃,以乙腈为流动相A,以0.1%冰醋酸水溶液为流动相B,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱过程中,流动相A和流动相B的变化为:
0-8min,流动相A 0-5%,流动相B 100%-95%;
8-13min,流动相A 5%-15%,流动相B 95%-85%;
13-30min,流动相A 15%-20%,流动相B 85%-80%;
30-45min,流动相A 20%-30%,流动相B 80%-70%;
45-70min,流动相A 30%-60%,流动相B 70%-40%;
70-80min,流动相A 60%-90%,流动相B 40%-10%;
80-90min,流动相A 90%-10%,流动相B10%-90%。
2.根据权利要求1所述的调经养荣汤中多种有效成分的含量测定方法,其特征在于,步骤S1中,取各标准品适量,精密称定,分别置于10mL容量瓶中,加甲醇溶解定容,配制成含有阿魏酸150μg/mL、藁本内酯200μg/mL、芍药苷180μg/mL、地黄苷D 120μg/mL、丹酚酸B 240μg/mL、丹参酮ⅡA 360μg/mL、延胡索乙素300μg/mL、丹皮酚400μg/mL、香附烯酮180μg/mL、α-香附酮240μg/mL、橙皮苷800μg/mL、白术内酯Ⅰ300μg/mL、白术内酯Ⅱ240μg/mL、白术内酯Ⅲ280μg/mL及羟基红花黄色素A240μg/mL的混合对照品溶液。
3.根据权利要求1所述的调经养荣汤中多种有效成分的含量测定方法,其特征在于,步骤S2中,精密量取调经养荣汤5mL,置于25mL容量瓶中,加入适量甲醇,超声处理20min,放冷,用甲醇定容至刻度线,密塞摇匀,取适量5000rpm离心10min,精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中,加50%甲醇定容至刻度,混匀,即得供试品溶液。
4.根据权利要求1所述的调经养荣汤中多种有效成分的含量测定方法,其特征在于,步骤S2中,检测波长为:0-13min,230nm;13-22min,300nm;22-26min,403nm;26-30min,286nm;30-45min,245nm;45-90min,270nm。
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