[发明专利]一种双酚S和铅联合污染的生物模型及其建立方法

权利要求书

1.一种双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，包括：

（1）制备含双酚S和铅的NGM培养基：

将双酚S溶于乙醇溶液中，蒸馏水稀释硝酸铅溶液，分别配制不同浓度的双酚S溶液和铅溶液，将两者混合，将不同浓度的混合溶液和E. coli OP50再次混合后分别涂布到空白的NGM培养基；

（2）建立双酚S和铅联合污染的生物模型：

向含双酚S和铅的NGM培养基中等量分配L1期的秀丽隐杆线虫，培养至L4期时，用M9把培养基上的秀丽隐杆线虫冲洗至管中，得到秀丽隐杆线虫暴露于不同浓度双酚S和铅下的生物模型；

所述双酚S和铅联合污染的生物模型中，双酚S的模拟线性方程为PROBIT（p）=0.759x-2.950，双酚S的半致死浓度LC₅₀=3.884mM；所述混合溶液中双酚S的终浓度为1/2双酚S的半致死浓度LC50和双酚S的半致死浓度LC50；

铅的模拟方程为PROBIT（p）=0.007x+1.882，铅半致死浓度LC₅₀=289.075μM；所述混合溶液中铅的终浓度为1/2铅的半致死浓度LC50和铅的半致死浓度LC50；

所述双酚S和铅联合污染的生物模型对秀丽隐杆线虫的运动行为和神经毒性上均起着拮抗作用。

2.根据权利要求1所述的双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，步骤（1）中，所述乙醇在混合溶液中的终浓度为0.1%。

3. 根据权利要求1所述的双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，步骤（1）中，所述混合溶液和E. coli OP50的体积比为1:1。

4. 根据权利要求1所述的双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，步骤（1）中，混合溶液与E. coli OP50的混合液的涂布总量为50μL。

5. 根据权利要求1所述的双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，所述L1期的秀丽隐杆线虫的培养方法为：在NGM培养基表面涂布E. coli OP50，然后在培养基中接种秀丽隐杆线虫扩大培养；接着将培养后的秀丽隐杆线虫冲洗，沉淀，洗涤；接着向沉淀中依次加入M9、NaClO和NaOH，震荡得秀丽隐杆线虫虫卵，孵育虫卵，获得处于L1期的秀丽隐杆线虫。

6.根据权利要求1所述的双酚S和铅联合污染的生物模型的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，所述培养的条件为：在20℃下培养48h。