[发明专利]一种用于人体维生素B12含量检测的释放剂及其应用

权利要求书

1.一种用于人体维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，用于定量检测人血清或肝素血浆样品中的维生素B12含量，所述释放剂包括变性剂R1和中和剂R3；变性剂R1为Tris -Hcl体系强碱溶液，中和剂R3为Tris-Hcl体系的无水乙醇、三(2-羧乙基)膦溶液；

所述中和剂R3的 pH值为6.0～6.6，包括：Tris-Hcl，浓度为90.0～90.8 g/L；无水乙醇，浓度为200.0-220.0 g/L；8-氨基-1-磺酸萘铵盐，浓度为0.8-1.2g/L；三(2-羧乙基)膦，浓度为1.0-1.6g/L；EDTA，浓度为0.8-1.2g/L；

所述变性剂R1的pH值为12.0～13.0，包括：Tris-Hcl，浓度为7.5～8.2 g/L；氢氧化钠，浓度为20.0-22.0 g/L。

2.根据权利要求1所述的用于人体维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，所述变性剂R1的pH值为12.5，包括：Tris-Hcl，浓度为8.0 g/L；氢氧化钠，浓度为21.0 g/L；其余为去离子水；变性剂R1的制备：称取纯化水700g，依次加入8g Tris-Hcl、21g氢氧化钠混合均匀，调整pH至12.5±0.05范围内，用纯化水定重至1L。

3.根据权利要求1所述的用于人体维生素B12含量检测的释放剂，其特征在于，所述中和剂R3 的pH值为6.3，包括：Tris-Hcl，浓度为90.4 g/L；无水乙醇，浓度为210.0 g/L；8-氨基-1-磺酸萘铵盐，浓度为1.0 g/L；三(2-羧乙基)膦，浓度为1.3g/L；EDTA，浓度为1.0g/L；其余为去离子水；中和剂R3的制备：称取纯化水700g，依次加入90.4g Tris-Hcl、210g无水乙醇、1g 8-氨基-1-磺酸萘铵盐、1.3g三(2-羧乙基)膦、1g EDTA混合均匀，调整pH至6.3±0.05范围内，用纯化水定重至1L。

4.一种用于测定人体维生素B12含量的磁微粒化学发光检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括权利要求1-3任一所述的释放剂，还包括维生素B12试剂R2、磁分离试剂、校准品、质控品、化学发光底物液；

配制试剂R2：1）试剂R2的缓冲液采用商品化的AP Conjugate Stabilizer，pH为7.0；2）制备碱性磷酸酶标记的抗维生素B12抗体；3）将碱性磷酸酶标记的抗维生素B12抗体用试剂R2的缓冲液进行稀释；

检测试剂的灵敏度为：最低检出量为 20.00pg/mL；重复性：靶值浓度范围为200pg/mL±20%的质控品QC1的精密度为5.24 %，靶值浓度范围为1000pg/mL±20%的质控品QC2精密度为4.62 %。