[发明专利]一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基及其应用

说明书

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基及其应用。所述继代培养基中的激素包括TDZ、NAA、脯氨酸和酵母提取物。利用本发明提供的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基，可筛选出高产喜马拉雅紫茉莉愈伤组织细胞系，实现在常温下快速生长，在改变培养条件的情况下可诱导喜马拉雅紫茉莉愈伤组织产生花青素，且类黄酮含量提高，实现了常温大量培养与诱导重要次生代谢产物相结合的二段式培养方式，解决了细胞生长与次生代谢产物积累的矛盾问题。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基及其应用。

背景技术

天然产物广泛地存在于植物体内，是药物、食品添加剂和新型生物燃料等开发的主要来源，具有重要的商业价值。近年研究表明，类黄酮具有广泛的抗炎、抗肥胖、抗糖尿病、抗氧化等特性，还可延缓动物模型和肿瘤细胞模型的体内肿瘤恶化，起到抑制癌基因和激活抑癌基因的作用。

类黄酮主要存在于被子植物中，是植物组织中红色、蓝色及紫色等主要色素成分，同时化合物种类具有物种特异性。目前具有生物活性的结构体数量已超过10000种以上，主要包括花青素、黄酮醇、黄烷酮、异黄酮、黄烷醇等几大类。

研究发现，类黄酮是拟南芥耐寒性和冷适应能力的决定因素。Ubi等认为低温胁迫是葡萄、玉米、甘蔗、红橙、苹果和银杏花青素产量增加的一个重要因素，并认为低温是诱导类黄酮积累的主要环境因子(Ubi B E,Honda C,Bessho H,et al.Expression analysisof anthocyanin biosynthetic genes in apple skin:effect of UV-B andtemperature[J].Plant Science,2006,170(3):571-578)。汪海峰等发现，高海拔地区日照越长，更有利于银杏叶黄酮苷的积累(汪海峰,鞠兴荣,何广斌,等.不同海拔高度和生长季节对银杏叶中黄酮苷含量的影响.林产化学与工业,2002(04):47-50)。Czemmel等证实，紫外光UV-B能调控葡萄的黄酮醇通路基因的合成与表达，使类黄酮含量提高(Czemmel S,J,Loyola R,et al.Transcriptome-wide identification of novel UV-B andlight modulated flavonol pathway genes controlled by VviMYBF1[J].Frontiers inPlant Science,2017,8:1084.)。

高山植物色彩鲜艳，富含类黄酮等次生代谢产物，也是药用成分的物质基础，这些重要药用成分是植物与环境长期协同进化产生的一类防御物质。Ziska等发现，高海拔地区收集的种子在低海拔地区种植，仍保持了其母本具有较高的类黄酮累积及紫外吸收能力，表明遗传(物种)和生长环境是影响植物药用成分的主要因素，因此类黄酮等药用成分的生物合成机制具有物种特异性和遗传稳定性，这为高山植物的引种驯化及组织培养扩繁奠定了理论基础(Ziska L H，Termura A H，Sullivan J H.Physiological sensitivity ofplants along an elevational gradient to UV-B radiation[J].1992,79:863-871)。