[发明专利]一种生物有机肥发酵剂及其制备方法

权利要求书

1.一种生物有机肥发酵剂，其特征在于,包括复合微生物菌群，复合微生物菌群包含嗜低温白地霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、褐球固氮菌、植物乳杆菌。

2.根据权利要求1所述的一种生物有机肥发酵剂，其特征在于，嗜低温白地霉1-3份，枯草芽孢杆菌1-3份，地衣芽孢杆菌1-3份，褐球固氮菌1-3.5，份植物乳杆菌0.5-1份。

3.根据权利要求1所述的一种生物有机肥发酵剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、嗜低温白地霉培养方法如下：种子培养基为20g麦芽浸膏，(4000转/分离心10分钟)，PH自然，121℃蒸汽灭菌20分钟，冷却后得白地霉种子培养基，在无菌操作台中取一接种耙菌种接种于前述制得种子培养基中，空气浴摇床200转/分，28℃培养24小时，得到液体种子；

取120目鱼粉5kg，120目豆粕粉5kg，120目玉米粉2.5kg，过磷酸钙0.3kg，维生素B族0.5kg，于机械搅拌通风发酵罐中28℃培养18h，150转/分钟，通气量为每分钟每立方发酵体积0.5立方除菌空气，得发酵液；

步骤二、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌培养方法如下：为5g牛肉膏，10蛋白胨，3g氯化钠，4000转/分离心10分钟)，PH7.5，121℃蒸汽灭菌20分钟，冷却后得细菌培养基，在无菌操作台中取一接种环细菌接种于前述制得种子培养基中，空气浴摇床200转/分，37℃培养18小时，得到液体种子；

取120目鱼粉5kg，120目豆粕粉5kg，玉米糖化醪10kg，氯化钠1kg，氢氧化钠0.4kg磷酸氢二钠1.5kg，消泡剂0.5kg，于机械搅拌通风发酵罐中37℃培养18h，220转/分钟，通气量为每分钟每立方发酵体积1立方除菌空气，得发酵液；

步骤三、褐球固氮菌培养方法如下：种子培养基为0.2g磷酸二氢钾，0.8g磷酸氢二钾，0.2g七水硫酸镁，0.1g两水硫酸钙，0.001g氯化铁，0.001g两水钼酸钠，0.5g酵母膏，20g甘露醇，牛肉膏，10蛋白胨，3g氯化钠，(4000转/分离心10分钟)，PH自然，121℃蒸汽灭菌20分钟，冷却后得细菌培养基，在无菌操作台中取一接种环细菌接种于前述制得种子培养基中，空气浴摇床150转/分，30℃培养48小时，得到液体种子；

取玉米糖化醪40kg，玉米秸秆粉10kg，纤维素酶0.5kg，亚硫酸钠5kg，于机械搅拌通风发酵罐中28℃培养5天，150转/分钟，通气量为每分钟每立方发酵体积0.5立方除菌空气，得发酵液；

步骤五、植物乳杆菌培养方法如下：种子培养基为20g葡萄糖，10蛋白胨，10g牛肉膏，5g酵母粉，1g磷酸氢二钾，2g柠檬酸三胺，1ml吐温80，5g乙酸钠，0.5g七水硫酸镁，0.25g一水硫酸锰，(4000转/分离心10分钟)，PH5.5，121℃蒸汽灭菌20分钟，冷却后得乳杆菌培养基，在无菌操作台中取一接种环乳杆菌接种于前述制得种子培养基中，空气浴摇床100转/分，37℃培养24小时，得到液体种子；

取120目鱼粉5kg，120目豆粕粉5kg，120目玉米粉5kg，葡萄糖10kg，乳糖2kg，氯化钠1kg，磷酸氢二钠1.5kg，消泡剂0.5kg，于机械搅拌通风发酵罐中37℃培养24h，100转/分钟，通气量为每小时通风10分钟，每立方发酵体积0.5立方除菌空气，得发酵液；

步骤六、按配比称取嗜低温白地霉1-3份，枯草芽孢杆菌1-3份，地衣芽孢杆菌1-3份，褐球固氮菌1-3.5，份植物乳杆菌0.5-1份混合在一起，即可制复合微生物发酵剂，其活性不小于1×10¹⁰cfu/ml。

步骤七、将步骤六中所得复合微生物发酵剂按照千分之五至千分之十比例添加至固体发酵原料中，固体发酵原料调整水分至55％-65％之间，固体发酵原料为秸秆、牛粪、或者秸秆和牛粪中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的一种生物有机肥发酵剂的制备方法，其特征在于，步骤七中，其中秸秆需进行机械粉碎预处理，粉碎长度不长于5cm，固体发酵原料中的牛粪，应为脱水牛粪，脱水后含水率应不高于65％。