[发明专利]一种毛发中毒品快速检测试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种毛发中毒品快速检测的试剂盒及其检测方法。本发明通过免疫小鼠实验筛选得到甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮等毒品的高特异性单克隆抗体，并通过生物素标记得到相应的特异性抗体标记物，其能够与酶标板中包被的抗原反应，抗原又与毛发中的毒品产生竞争反应，利用亲和素‑辣根过氧化物酶级联放大反应，与四甲基联苯胺(TMB)显色，对甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮等毒品的含量进行检测，这大大提高了毛发检测试剂盒的灵敏度。同时，本发明还优化复配了一种毛发消化液，使毒品滥用者毛发中甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮能充分溶出，而不产生杂蛋白，避免交叉反应，降低检测结果的假阳性率，保证了本试剂盒检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及毒品检测领域，具体涉及一种毛发中毒品快速检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

毒品是一类人工合成的兴奋剂，对中枢神经和交感神经具有“致幻”性，常见的毒品有甲基苯丙胺、海洛因、吗啡、美沙酮、氯胺酮、可卡因等。甲基苯丙胺，俗称“冰毒”，在我国滥用最为广泛，它在体内主要是通过肝脏进行代谢作用，主要方式为羟基化或N-脱氧基化，最后大部分经肾脏以原药的形式排出体外，其余则进行N-脱氧基反应，产生甲基苯丙胺。吗啡，是从鸦片中提炼出的生物碱，具有镇痛及催眠作用，在医学上，可用作麻醉性镇痛药，其具有抑制中枢神经系统的功能，使用者易产生耐受和依赖，极易成瘾。氯胺酮，俗称“K粉”，也是近年来我国滥用较为严重的毒品之一，青少年亚文化群体是其主要的吸食人群，氯胺酮使用后会产生长时间的幻觉和精神错乱，持续使用海会使人产生心理依赖。目前，滥用毒品导致的精神依赖很难祛除，严重者甚至会出现幻觉、精神错乱、自杀、心脑血管意外和暴力行为，威胁人类的生命健康和社会安全。

目前，毒品检测中较常使用的生物样本主要包括血液、尿液、唾液和毛发等。其中，血液中毒品分析物含量较高，且使用的检测仪器要求不高，从而受到广泛的应用，但血液中存在的各种酶易导致待测物的降解，因此，血液的采集和储存较为困难。尿液是毒品常规的检测物，尿液采集过程中无创伤且样品预处理过程简单，但当吸毒三天甚至更长时间之后，尿液中的毒品就很难被检测或追溯。唾液采集过程更为方便，但毒品含量过低且易代谢不稳定，对检测技术及仪器具有较高的要求。相比于血液、尿液及唾液，毛发易获取、易保存、结果稳定、检测时限长，毒品在毛发中的代谢较慢，可长期存在，且有利于对取样过程进行监督，防止检材被掺假或调换，能够对单次给药后的痕量毛发样品进行检测，避免暂时性药物切断或掺假造成的假阳性或假阴性结果，并可提供个体吸毒者长期用药信息。

毒品进入毛发后，被包埋在毛发中的角蛋白中，不能直接进行检测，需先将其释放为游离状态方可进行检测。与尿液或血液毒品分子含量通常为μg/ml级相比，毛发中毒品及其代谢物的含量很低，仅为ng/mg级，因此，如何快速、高效、安全地从人体毛发中提取毒品小分子是当前首要的技术难题。毛发中待测物的释放方式有酸解、碱解、酶解、甲醇和乙腈等有机试剂消解等。酸性水解条件温和，释放效率高但水解时间较长。碱性水解剧烈，但生物基质干扰过大。甲醇、乙腈等有机溶剂超声水解存在环境污染、操作复杂、基层不易推广等问题。酶解条件温和，专一性强，专利CN110208072A即公开了一种用于痕量毒品检测的人体毛发快速裂解液，包括碱性蛋白酶、巯基乙醇、甘氨酸、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液、氯化钠-氢氧化钠缓冲液、Triton X-100、二硫苏糖醇(DTT)等，但该配方成分复杂，易沉淀分层，影响使用效果。