[发明专利]改变效应功能的Fc变体及其融合蛋白

说明书

本发明公开了一种改变效应功能的Fc变体及其融合蛋白，其Fc区包含一个或多个氨基酸改变，具有改变的效应功能；进一步的，公开了包含改变效应功能的Fc变体的融合蛋白，以及此类Fc变体或融合蛋白的制备方法，编码此类Fc变体或融合蛋白的核酸，包含所述核酸的表达载体，包含所述Fc变体或融合蛋白、核酸或表达载体的宿主细胞，包含此类Fc变体或融合蛋白的药物组合物，以及此类Fc变体或融合蛋白的用途。

技术领域

本发明涉及生物制药领域，尤其涉及一种改变效应功能的Fc变体，其Fc区包含一个或多个氨基酸改变，其具有改变的效应功能；进一步的，本发明涉及包含改变效应功能的Fc变体的融合蛋白。

背景技术

抗体的Fc区与许多Fc受体及配体相互作用，行使一系列重要的功能，称为效应器功能(effector function)。IgG抗体的Fc受体被称为FcγR，IgE的为FcεR，IgA的为FcαR等等。已经鉴定了FcγR的三个亚类：FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)和FcγRIII(CD16)。Fc受体的另一种类型是新生Fc受体(FcRn)。

由抗体Fc区介导的效应功能可以分为两种：(1)在抗体与抗原结合之后发挥作用的效应功能(这些功能涉及参与补体级联反应或Fc受体(FcR)-负荷细胞)；和(2)不依赖于抗原结合而发挥作用的效应功能(这些功能提供在血循环中的持续性和通过胞吞作用穿过细胞屏障的能力)。

近年来抗体Fc区常用来制备各种融合蛋白，融合蛋白的Fc段能够与各类免疫白细胞上表达的FcγRs受体结合，从而产生Fc段介导的细胞毒作用(ADCC)以及补体依赖的细胞毒性(CDC)效应，靶向杀伤功能蛋白受体阳性细胞，会影响融合蛋白发挥活性而为减弱治疗类融合蛋白Fc段与FcγRs受体的亲和力而设计的基因突变，通常会导致融合蛋白与FcRn受体亲和力的下降，降低其在体内的半衰期。

发明内容

本发明旨在至少一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，在本发明的第一方面，提供了一种Fc变体，旨在减弱Fc与各类免疫白细胞上表达的Fc受体，即FcγRs(主要包括FcR gamma I,FcR gamma IIa,FcR gamma IIb以及FcR gamma IIIa)之间的亲和力，从而降低或者消除Fc段介导的细胞毒作用(antibody-dependent cellmediatedcytotoxicity，ADCC)或结合补体C1q介导的补体依赖的细胞毒性(complement-dependentcytotoxicity，CDC)效应，并且保持其与新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor，FcRn)的亲和力不变或增强，不影响体内半衰期。

根据本发明的实施例，其中依照EU编号方式，所述Fc变体在选自第233，235，237，238，265，297，327，434位的至少一处包含氨基酸取代。

根据本发明的实施例，所述Fc优选为IgG Fc，其中IgG Fc为IgG1 Fc，IgG2 Fc，IgG3Fc，IgG4 Fc中的一种，优选是IgG1 Fc，更优选人IgG1 Fc。

根据本发明的实施例，其中所述氨基酸取代选自E233P，L235A，G237A，P238A，D265A，N297A，A327Q，和N434A中的至少一种。

根据本发明实施例，其中所述氨基酸取代选自E233P，L235A，G237A，P238A，D265A，N297A，A327Q，和N434A中的至少三种。

根据本发明实施例，所述氨基酸取代为选自：E233P，P238A，D265A；N297A，L235A，N434A；和A327Q，G237A，L235A的三氨基酸取代。

在本发明的第二方面，本发明提供了一种Fc变体融合蛋白，具体地，本发明涉及如下实施方式：

实施方案1.一种融合蛋白，其结构为如下式所示：