[发明专利]肝素钠精品及其提取方法和应用

说明书

本发明公开了一种肝素钠精品及其提取方法和应用。该提取方法包括以下步骤：(1)预处理，得沉淀A；(2)酸碱处理：对沉淀A水溶液调节pH值为1.5～2.0，过滤，得酸性滤液；对所述酸性滤液的调节pH值为11～12，在90～92℃下搅拌后过滤，得碱性滤液；将所述碱性滤液酒沉，得沉淀B；(3)氧化：对沉淀B水溶液进行2～4次氧化，得沉淀C；(4)冻干。本发明的提取方法可有效防止朊病毒进入肝素钠精品中，所述肝素钠精品中不含朊病毒，并且其他类型的蛋白杂质含量也很低，有很大的市场应用价值。

技术领域

本发明涉及一种肝素钠精品及其提取方法和应用。

背景技术

肝素钠是一种临床应用非常广泛的抗凝血药物，其基础原料从哺乳动物的内脏组织内提取。常用的来源为猪小肠粘膜、牛肺和牛小肠粘膜、羊小肠粘膜，其中猪小肠粘膜是最主要的提取来源。随着全球肝素钠供应紧张，以及猪病疫情频发，牛羊来源的肝素钠有了重回主流市场的潜力。

牛、羊在历史中曾出现过克雅氏病(俗称疯牛病，BSE)和羊瘙痒症(TSE)。BSE/TSE的致病源为朊病毒(朊蛋白)，是一个可以自我复制并使正常蛋白变异的蛋白类物质，由于其无典型病毒结构，不激发免疫反应，故人体无法抵御朊病毒(朊蛋白)的感染。人类感染朊病毒(朊蛋白)后，会导致中枢神经病变而致死。虽然朊病毒(朊蛋白)并不是一种常见的杂质，出现的几率可能只有几百万分之一，但是鉴于其高微危险性，有必要在提取牛羊来源的肝素钠时，去除可能的朊病毒(朊蛋白)，将感染朊病毒(朊蛋白)的可能性降到最低。然而，朊病毒(朊蛋白)结构特殊，可抵抗紫外线、高温、辐射等传统杀灭手段，因此，亟需一种有效去除牛羊来源的肝素钠中的朊病毒的方法。

发明内容

本发明为了解决现有技术中牛或羊肝素钠提取方法无法去除朊病毒的缺陷，从而提供了一种肝素钠精品及其提取方法和应用。本发明所述的提取方法可有效防止朊病毒进入肝素钠精品中，所述肝素钠精品中不含朊病毒，并且其他类型的蛋白杂质含量也很低。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了一种肝素钠精品提取方法，其包括以下步骤：

(1)预处理：对肝素钠粗品水溶液的调节pH值为7～9，然后与树脂混合，吸附后过滤，收集吸附树脂；用氯化钠水溶液洗脱所述吸附树脂，合并洗脱液；将所述洗脱液酒沉，得沉淀A；

(2)酸碱处理：对沉淀A水溶液调节pH值为1.5～2.0，过滤，得酸性滤液；对所述酸性滤液的调节pH值为11～12，在90～92℃下搅拌后过滤，得碱性滤液；将所述碱性滤液酒沉，得沉淀B；

(3)氧化：对沉淀B水溶液进行2～4次氧化，在第一次氧化结束后，将氧化溶液酒沉，得沉淀B1，对沉淀B1水溶液进行第二次氧化，依次类推；在最后一次氧化结束后，对氧化溶液中进行还原，得还原溶液，对还原溶液调节pH值为6～7，酒沉，得沉淀C；

(4)冻干：对沉淀C溶水溶液调节pH值为5.5～7，过滤，对所得滤液进行冻干。

步骤(1)中，所述肝素钠粗品可为市售可得的牛或羊肝素钠粗品。所述肝素钠粗品的效价一般为20～60IU/mg。按肝素钠粗品的效价计，所述肝素钠粗品水溶液的浓度较佳地为10000～15000IU/mL。

步骤(1)中，在调节pH值之前，较佳地，向肝素钠粗品水溶液中加入氯化钠。所述氯化钠的用量较佳地为1.5％～4％，所述百分比为所述氯化钠占所述肝素钠粗品水溶液的质量百分比。

步骤(1)中，所述树脂可为本领域常规，较佳地为阴离子交换树脂，更佳地为强阴离子交换树脂，例如FPA98型阴离子交换树脂、WD-1701型阴离子交换树脂或D-254型阴离子交换树脂。所述树脂的用量可为本领域常规，较佳地为1kg肝素钠粗品用20～50kg树脂。

步骤(1)中，所述吸附的温度可为本领域常规，较佳地为55～65℃，例如60℃。所述吸附的时间可为3～6小时。