[发明专利]一种酮型广藿香的组培快繁方法

说明书

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其是涉及一种酮型广藿香的组培快繁方法，包括无菌外植体的获取、愈伤组织诱导培养、丛生芽诱导增殖不定芽增殖培养、生根培养和移栽。本发明酮型广藿香的组培快繁方法具有成功率高、诱导率高、繁殖系数高、遗传稳定性高、种苗品质好、成本低、种苗生长一致等特点，具有普遍的适用性。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其是涉及一种酮型广藿香的组培快繁方法。

背景技术

广藿香(Pogostemon cablin(Blanco)Benth.)为唇形科刺蕊草属植物，以干燥地上部分入药，具有芳香化浊，开胃止呕，发表解暑之功效，是著名的“十大南药”之一，被历代医家视为暑湿时令之要药，是“藿香正气丸”“抗病毒口服液”等的30多种中成药的重要原料。目前广藿香主要分布在广东、海南，按照产地不同可以分为石牌藿香(牌香)、高要藿香(肇香)、湛江藿香(湛香)和海南藿香(琼香)4种，传统经验认为牌香品质最优，为道地药材，药用最佳，肇香与牌香品质相近；而湛香是在20世纪50年代从海南地区引种，其品质与琼香品质相近，主要用于提取广藿香油，药用价值较差。目前主要的药效成分广藿香醇和广藿香酮的含量变化及二者的比值有着显著的差别，据此广藿香被划分为两种化学型，牌香与肇庆高要莲塘广藿香以广藿香酮含量最高，为酮型广藿香，而湛香与琼香以广藿香醇含量最高，为醇型广藿香。

广藿香在广东、海南地区极少见开花，主要通过扦插繁殖。随着城市化发展，道地药材“酮型”石牌广藿香已濒临灭绝，石牌地区几乎已无种植，而与牌香品质最相近的为肇庆高要莲塘产地的广藿香，由于根系少、生长慢、扦插繁殖难度高、市场经济等原因，也越来越少人种植。虽有一些广藿香组织培养的研究，但酮型莲塘广藿香的组织培养研究未见报道。为挽救同样濒临灭绝的优质的药材品种—酮型莲塘广藿香，并为今后的优质品种改良及其学术研究保留种苗，建立酮型广藿香组培快繁方法显得尤为重要。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的之一是提供一种培养基简单、成功率高，诱导率高，繁殖系数高，遗传稳定性高，种苗品质好、成本低和广藿香酮含量高的酮型广藿香组培快繁方法，应用该方法能满足酮型广藿香人工栽培的规模化种植需求，以解决酮型广藿香资源日渐稀少而市场上供不应求的现状。

本发明的上述发明目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种酮型广藿香的组培快繁方法，包括如下步骤：

S1、无菌外植体的获取：摘取健康幼嫩的莲塘广藿香叶片，自来水冲洗1～2min，无菌吸水纸吸干表面水分，置于超净工作台上用75％的酒精漂洗2～5s，无菌水清洗2次，每次1min，再用5％次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水漂洗4～5次，每次1min，得到消毒的莲塘广藿香叶片；

S2、愈伤组织诱导培养：将步骤S1消毒的莲塘广藿香叶片剪成0.25～1cm²大小的小叶块并接种到诱导培养基中，先置于黑暗中培养7～10天，再给予光照条件培养35～40天，即可诱导得到愈伤组织；

S3、不定芽诱导增殖培养：将步骤S2诱导得到的愈伤组织接种到丛生芽诱导增殖培养基中，培养45～60天，得到增殖培养的不定芽；

S4、生根培养：从步骤S3增殖培养的不定芽的基部剪取1.0～3.0cm不定芽，接种到生根培养基中，培养8～10天不定芽开始生根，继续培养40～45天获得可移载试管苗；

S5、移栽：将步骤S4得到的可移载试管苗取出，冲洗干净根部的培养基后，在自然光下用普通自来水中水培炼苗5～7天，期间用透明塑料薄膜覆盖，移栽至普通土壤中，浇以0.5％多菌灵和0.2％生根粉混合溶液，即得。