[发明专利]一种酮型广藿香的组培快繁方法

权利要求书

1.一种酮型广藿香的组培快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、无菌外植体的获取：摘取健康幼嫩的莲塘广藿香叶片，自来水冲洗1～2min，无菌吸水纸吸干表面水分，置于超净工作台上用75％的酒精漂洗2～5s，无菌水清洗2次，每次1min，再用5％次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水漂洗4～5次，每次1min，得到消毒的莲塘广藿香叶片；

S2、愈伤组织诱导培养：将步骤S1消毒的莲塘广藿香叶片剪成0.25～1cm²大小的小叶块并接种到诱导培养基中，先置于黑暗中培养7～10天，再给予光照条件培养35～40天，即可诱导得到愈伤组织；

S3、不定芽诱导增殖培养：将步骤S2诱导得到的愈伤组织接种到丛生芽诱导增殖培养基中，培养45～60天，得到增殖培养的不定芽；

S4、生根培养：从步骤S3增殖培养的不定芽的基部剪取1.0～3.0cm不定芽，接种到生根培养基中，培养8～10天不定芽开始生根，继续培养40～45天获得可移载试管苗；

S5、移栽：将步骤S4得到的可移载试管苗取出，冲洗干净根部的培养基后，在自然光下用普通自来水中水培炼苗5～7天，期间用透明塑料薄膜覆盖，移栽至普通土壤中，浇以0.5％多菌灵和0.2％生根粉混合溶液，即得。

2.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S2中的诱导培养基的配方为：MS+1.0～2.0mg/L 6-BA+0.05～0.2mg/L 2,4-D+20～50mg/L PVP+10～20mL/L椰子汁，20～40g/L蔗糖和5.0～7.0g/L琼脂，pH为5.8～6.0，所述诱导培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

3.根据权利要求2所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S2中的诱导培养基的配方为：MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+25mg/L PVP+15mL/L椰子汁，30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂，pH为5.8，所述诱导培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

4.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S3中的诱导增殖培养基的配方为：MS+0.2～1.0mg/L 6-BA+0.1～0.2mg/L NAA或0.5～1.0mg/L IBA，20～40g/L蔗糖和5.0～7.0g/L琼脂，pH为5.8～6.0，所述诱导增殖培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

5.根据权利要求4所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S3中的诱导增殖培养基的配方为：MS+0.2mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂，pH为5.8，所述诱导增殖培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

6.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S4中的生根培养基的的配方为：1/2MS+0.1～0.2mg/L IBA，20～40g/L蔗糖和5.0～7.0g/L琼脂，pH为5.8～6.0，所述生根培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

7.根据权利要求6所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S4中的生根培养基的的配方为：1/2MS+0.1mg/L IBA，30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂，pH为5.8，所述生根培养基需在温度115℃下高温湿热灭菌20min冷却后备用。

8.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤S2愈伤组织诱导培养、步骤S3丛生芽诱导增殖不定芽增殖培养和步骤S4生根培养的培养温度为25～26℃，光照强度为1500～2000lx，光照时间为14～16小时/天。