[发明专利]枸橼酸托法替布中杂质检测分析方法

说明书

通过实例1(发明方法)和实例2(进口药品注册标准)对比，表明本发明方法更优。本发明公开枸橼酸托法替布中杂质检测分析方法，通过优化色谱条件，采用高效液相色谱法对枸橼酸托法替布中13个杂质进行检测，提高了枸橼酸托法替布产品质量控制的检测手段，同时提高了该产品的安全性。

技术领域

本发明属于药物新技术领域，涉及枸橼酸托法替布中13个杂质(降解杂质和工艺杂质)的分析测定方法。具体的说是一种高效液相色谱法，采用紫外检测器，选用适当的流动相和色谱柱，对枸橼酸托法替布中13个杂质进行定量分析。

背景技术

枸橼酸托法替布(tofacitinibcitrate)，化学名为3-[(3R，4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]哌啶-1-基]-3-氧代丙腈枸橼酸Chemicalbook盐，是美国辉瑞公司研发的一种新型Janus激酶抑制剂，2012年11月经美国FDA批准上市，商品名Xeljanz。本品可联合甲氨喋呤用于治疗对肿瘤坏死因子抑制剂应答不足的活动性类风湿性关节炎。为了更好的控制枸橼酸托法替布的质量，提高药物的安全性，故需对枸橼酸托法替布合成工艺中可能产生的杂质(包括降解杂质和工艺杂质)进行严格监控，枸橼酸托法替布中常见的杂质结构式如下所示：

虽然目前已有枸橼酸托法替布片进口药品注册标准(JX20130251)，但是该标准中的有关物质检测方法为超高液相色谱法，成本高，适用性低，且该方法稀释剂干扰大，检测能力低，无法满足枸橼酸托法替布的检测需求，更无法有效控制枸橼酸托法替布的质量，提高药物的安全性。故需开发一种适用范围广，成本低，操作简单的方法进行质量控制。

发明内容

本发明目的在于提供一种稳定性好、重现性好、操作简单、精密度高，用于枸橼酸托法替布中13个杂质的检测方法。应用该方法测定枸橼酸托法替布中13个杂质，方便可行，准确度高，能有效控制枸橼酸托法替布的质量，提高药物的安全性。

本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是：枸橼酸托法替布中杂质检测分析方法，采用普通高效液相色谱法，进样体积为5～100μl，利用紫外检测器，检测波长210nm～350nm，流动相流速为0.3～2.0ml/min，烷基键合硅胶色谱柱为固定相，柱温为20～30℃，流动相：以甲酸铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，流动相采用以下方式进行梯度洗脱：

0～60min，流动相A的比例为80％～90％，流动相B的比例为10％～20％；

60～70min，流动相A比例变为40％～60％，流动相B的比例变为40％～60％；

71～80min，流动相A比例变为80％～90％；流动相B的比例变为10％～20％。

本发明所述的枸橼酸托法替布中杂质为如下13种：

在本发明的一些实施例中，流动相A为2～5g/L的甲酸铵溶液，在一些具体的实施例中，流动相A为3g/L的甲酸铵溶液。

在一些实施例中，甲酸铵溶液的pH值为3～5，在一种具体的实施例中，pH值为4。pH值可用本领域常规方法调整，例如选用甲酸进行调节。

本发明所述检测方法，枸橼酸托法替布检测时用溶剂溶解稀释成每1ml中含枸橼酸托法替布0.2mg～1mg的溶液作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪。在上述技术方案基础上，将枸橼酸托法替布用溶剂溶解稀释成每1ml中含枸橼酸托法替布0.2mg～1mg的溶液作为供试品溶液。所述溶剂为流动相、水，最佳为流动相；供试品溶液浓度最佳为0.7mg/ml。