[发明专利]增加骨密度营养高钙粉中维生素D2含量测定方法

说明书

本发明属于保健食品实验技术分析检测领域，具体涉及一种增加骨密度营养高钙粉中维生素D2含量测定方法。包括下述步骤：(1)配制样品溶液，包括增加骨密度营养高钙粉样品供试品溶液及维生素D2标准品溶液；(2)标准曲线的制作；(3)样品测定:吸供试品溶液注入反相液相色谱仪中,得到待测物与内标物的峰面积比值,根据标准曲线得到待测液中维生素D2的浓度。使用本申请的技术方法不存在皂化过程，省去该步骤，节省了时间。节省了仪器分析步骤。

技术领域

本发明属于保健食品实验技术分析检测领域，具体涉及一种增加骨密度营养高钙粉中维生素D2含量测定方法。

背景技术

增加骨密度营养高钙粉，一种多营养补钙剂，冲服，用于人体补钙剂，其含有维生素D2，当前采用原有技术标准GB 5009.82-2016进行检测标准，操作过于复杂，设备器材类型涉及多种，应用耗时长，不利于结果准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种增加骨密度营养高钙粉中维生素D2含量测定方法。

本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：

一种增加骨密度营养高钙粉中维生素D2含量测定方法，包括下述步骤：

(1)配制样品溶液，包括增加骨密度营养高钙粉样品供试品溶液及维生素D2标准品溶液；

(2)标准曲线的制作:将维生素D2标准品溶液注入反相液相色谱仪中,用流动相甲醇进行等度洗脱，得到维生素D2色谱峰；以峰面积比为纵坐标,以维生素D2标准工作液浓度为横坐标绘制维生素D2标准曲线；

(3)样品测定:吸供试品溶液注入反相液相色谱仪中,得到待测物与内标物的峰面积比值,根据标准曲线得到待测液中维生素D2的浓度。

所述供试品溶液制备步骤如下：

a样品溶解液：取样品粉末适量，按照5:1的比例加入抗坏血酸，加入定量水进行充分溶解，得到溶解液；

b样品提取液：将a步骤得到的溶解液计入石油醚进行分次萃取，萃取分层得到的有机相合并干燥蒸发；蒸发后加入石油醚进行定容，即为提取液；

c供试品溶液：转移b提取液至离心管内，氮气吹扫，将溶剂挥发掉，使用定量甲醇溶解,低温过夜静置，过滤，即为供试品溶液。

优选的，步骤b中石油醚为沸程为60-90℃的石油醚。

高效液相色谱仪的使用条件为：0-25分钟，100％流动相体积；流动相为色谱级甲醇；所述流动相的流速：1.0mL/min；柱温为30-40℃，检测波长为263nm；注入体积为20微升；柱温为33℃。碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(一)标准方法前处理存在皂化过程复杂，不易制备除杂保真样品。改进方法省去该步骤，节省了时间。(二)原方法仪器测试需要正向色谱配合精密操作。改进方法省去该设备操作。节省了仪器分析步骤。(三)原方法采用抗坏血酸和BHT两种还原保护剂，改进方法只采纳了一种，可节省成本。(四)选择60-90℃石油醚提取振摇不易产生气泡，操作要领简单、易复制，并减少损失。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合最佳实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：

1、化学试剂:无水乙醇(色谱级)、抗坏血酸、无水硫酸钠、石油醚(60-90度)、甲醇(色谱级)以上试剂均为天津化学试剂三厂生产，除另有说明，均为分析纯；水为GB/T6682规定一级水。

2、试剂配制

2.1标准品配制