[发明专利]非洲猪瘟病毒E120R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点敲除毒株的构建有效
| 申请号： | 202010932707.1 | 申请日： | 2020-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN112057611B | 公开（公告）日： | 2021-04-20 |
| 发明（设计）人： | 郑海学;刘会胜;薛巧;朱紫祥;李攀;冯涛;李豪;马昭;党文;杨帆;曹伟军;刘湘涛 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61P31/20;C12N7/01;C12N15/85;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人： | 戴治娟 |
| 地址： | 730046 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 非洲 猪瘟 病毒 e120r 蛋白 作为 免疫抑制剂 应用 免疫抑制 位点敲 构建 | ||
1.通过缺失非洲猪瘟病毒E120R蛋白的免疫抑制功能制备非洲猪瘟重组病毒的应用，其特征在于，所述缺失包括将编码非洲猪瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
2.一种E120R蛋白免疫抑制功能丧失的非洲猪瘟重组病毒，其特征在于，将非洲猪瘟病毒中编码非洲猪瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
3.如权利要求2所述的非洲猪瘟重组病毒，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒为CN/GS/2018分离株。
4.一种非洲猪瘟疫苗，其特征在于，所述疫苗包含权利要求2或3所述的E120R蛋白免疫抑制功能丧失的非洲猪瘟重组病毒。
5.一种E120R蛋白免疫抑制功能丧失的非洲猪瘟重组病毒的制备方法，其特征在于，所述方法为：通过基因工程手段使编码非洲猪瘟病毒E120R蛋白72-73位氨基酸的核苷酸序列缺失。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒为CN/GS/2018分离株。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法为同源重组技术，所述方法包括以下步骤：
（1）选取编码E120R蛋白72-73位氨基酸基因片段上下游序列约1.0kb作左右为同源重组左臂和右臂，并分别克隆入pUC19载体中，获得重组转移载体；
（2）在步骤（1）所述重组转移载体左、右臂基因序列中插入筛选表达盒基因片段，获得同源重组转移载体；
（3）将步骤（2）所述同源重组转移载体转染至感染了亲本非洲猪瘟毒株的 BMDM细胞，纯化筛选获得E120R蛋白免疫抑制功能丧失的非洲猪瘟重组病毒。
8.如权利要求5-7任一所述方法制备获得的E120R蛋白免疫抑制功能丧失的非洲猪瘟重组病毒。
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