[发明专利]一种蓝莓花青素的提取分离纯化方法

权利要求书

1.一种蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将蓝莓果清洗干净并晾干，用盐水浸泡，再用清水洗净晾干，进行破碎处理，得蓝莓果浆；

（2）向上述蓝莓果浆中加混合酶Ⅰ，进行酶解，获得果浆酶解液Ⅰ；

（3）向上述果浆酶解液Ⅰ中加入酸性乙醇溶液作为提取剂，并置于玻璃容器中，做密封处理；

（4）将密封后的玻璃容器进行超声提取，获得超声提取产物，并进行减压过滤，得到粗提液；

（5）向上述粗提液中加入混合酶Ⅱ，静置酶解，并将酶解液真空浓缩；

（6）将上述浓缩液洗脱纯化，并将洗脱液真空浓缩冷冻干燥，得干燥后的蓝莓花青素提取产物；

所述混合酶Ⅰ成分为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶及木瓜蛋白酶；所述混合酶Ⅱ的成分为α-葡萄糖苷酶及α-鼠李糖苷酶；

所述混合酶Ⅰ中纤维素酶：半纤维素酶：果胶酶：木瓜蛋白酶的质量比为5:1:2:1，采用纤维素酶为4000U/g、半纤维素酶1000U/g、果胶酶1000U/g、木瓜蛋白酶1000U/g，混合酶Ⅰ与果浆比例为16-20g/kg果浆，酶解时间为1.5-2h；

所述混合酶Ⅱ中α-葡萄糖苷酶：α-鼠李糖苷酶的质量比为3:1，两种酶活力均为1000U/g，混合酶Ⅱ与粗提液比例为4g/L，酶解时间为1h-1.5h；

步骤（4）所述超声温度设定50℃，功率设定500w，时间0.5h-1h。

2.根据权利要求1所述的蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤（1）所述盐水浸泡步骤中，采用盐水的质量分数为10-15%，浸泡时间为0.5h-1h。

3.根据权利要求1所述的蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤（3）所述酸性乙醇溶液作为提取剂中酸性乙醇体积分数为60-70%，含有体积分数0.02-0.5%的冰醋酸，比例为3L/kg果浆酶解液Ⅰ，使用柠檬酸溶液调节pH值至3-4。

4.根据权利要求1所述的蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤（6）所述洗脱纯化中采用大孔树脂柱，上样量为0.1～0.5倍树脂柱体积，吸附0.5～24h，并用蒸馏水冲柱，乙醇溶液洗脱。

5.根据权利要求4所述的蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，所述大孔树脂柱采用AB-8或DX101型大孔树脂柱。

6.根据权利要求1所述的蓝莓花青素的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤（6）所述真空浓缩步骤温度为45℃，冷冻干燥温度为-40℃，时间24h-48h。