[发明专利]一种沙生槐蜂蜜的真实性评价方法

权利要求书

1.一种沙生槐蜂蜜的真实性评价方法，其特征在于，利用甲醇水对蜂蜜样本进行提取，而后采用UHPLC-Q-Orbitrap或LC-MS/MS检测蜂蜜样本，以氧化苦参碱为指示性物质，若蜂蜜样本中氧化苦参碱的含量介于4-17mg/kg时，则判断所述蜂蜜样本为沙生槐蜂蜜；若氧化苦参碱的含量低于4mg/kg，则判定所述蜂蜜样本为其它蜂蜜或者掺假沙生槐蜂蜜；

其中，所述蜂蜜样本与甲醇水的质量体积比1g：(9～11)mL，在所述甲醇水中，甲醇与水的体积比为2：(7～9)；

氧化苦参碱在UHPLC-Q-Orbitrap的精确提取离子流色谱图中含有m/z 265.19105准分子离子峰，其精确质量数的误差应当小于5ppm；氧化苦参碱色谱峰的保留时间为3.33min，保留时间偏差小于0.2min；

氧化苦参碱在LC-MS/MS的MS/MS图谱中应含有m/z134.09643、m/z 148.11208、m/z176.10712、m/z 205.13324、m/z 220.19360和m/z 247.17998中的一个或多个碎片离子峰，其精确质量数的误差应当小于10ppm；

采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，液相色谱条件如下：采用C18色谱柱，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B，采用梯度洗脱程序分离：0-2.0min，5％的流动相B；2.0-7.0min，5-30％的流动相B；7.0-14.0min，30-95％的流动相B；14-18min，95％的流动相B；18.0-18.1min，95-5％的流动相B；18.1-20.0min，5％的流动相B；

采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，质谱条件如下：离子源参数：鞘气的流速45arb；辅助气的流速10arb；挡锥气的流速0arb；电喷雾电压3.5kV；离子导管的温度320℃；S-lens RF level设为60V；离子源的温度350℃；采集的模式为正离子模式下的FullMS-ddMS²，碰撞能量为35eV；

采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，液相条件如下：采用C18色谱柱，柱温为25℃，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B；采用梯度洗脱程序分离：0-0.8min，5％的流动相B；0.8-1.2min，5-40％的流动相B；1.2-2.5min，40-90％的流动相B；2.5-3.5min，90％的流动相B；3.5-3.6min，90-5％的流动相B；3.6-6.0min，5％的流动相B；

采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，质谱条件如下：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；离子喷雾电压：3500V；雾化气压力：45psi；干燥气温度：300℃；干燥气流速：5L/min；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11L/min；采集的模式为正离子模式下的MRM模式，MRM参数如下：Fragementor 130V，265.2247.2，32eV；265.2205.1，38eV。