[发明专利]规模化生产病毒载体的无血清培养基、制备方法及其用途

说明书

本发明公开一种规模化生产病毒载体的无血清培养基、制备方法及其用途。本发明技术方案通过设计无血清培养基的组分，解决了传统培养基培养病毒回收率低的技术问题。

技术领域

本发明涉及生物制品技术领域，特别涉及一种规模化生产病毒载体的无血清培养基、制备方法及其用途。

背景技术

目前，细胞培养技术已成为工业化生产生物活性物质、疫苗、载体，如单克隆抗体、药用蛋白质、基因工程药物等常用的手段，细胞培养技术与基因工程技术、酶工程技术和发酵工程技术密切相关，在整个生物技术产业的发展中起到了关键的核心作用。此外，细胞培养技术的日臻完善，促进蛋白质表达纯化技术、病毒培养技术等的发展。从当前发展趋势来看，细胞悬浮培养、无血清培养是近年来生物技术产业化发展的方向。

相关技术中，利用293T细胞大规模制备病毒的培养方式主要采用带血清的培养基进行培养，但是血清来源复杂、供货稳定、有携带病毒的危险，增加了细胞表达产物安全性的不确定因素，具有可能导致过敏反应、批次间差异大、易受污染和成本较高等缺点。此外，血清中成分较为复杂，多含有分子量较大的组分，易影响病毒的分离纯化，且容易被支原体感染等缺点，导致制备的病毒的纯度不高、品质较差、回收率低的不利影响。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种规模化生产病毒载体的无血清培养基、制备方法及其用途，以解决传统培养基培养病毒回收率低的技术问题。

为实现上述目的，本发明提出一种规模化生产病毒载体的无血清培养基，包括如下组分：

甘氨酸40～50mg/L、L-丙氨酸50～60mg/L、L-缬氨酸88～98mg/L、L-亮氨酸210～250mg/L、L-异亮氨酸110～140mg/L、L-甲硫氨酸50～60mg/L、L-脯氨酸210～250mg/L、L-色氨酸50～70mg/L、L-丝氨酸400～430mg/L、L-酪氨酸120～160mg/L、L-半胱氨酸15～45mg/L、L-苯丙氨酸300～360mg/L、L-天冬酰胺25～45mg/L、L-天冬氨酸30～50mg/L、L-谷氨酰胺800～1200mg/L、L-苏氨酸200～250mg/L、L-谷氨酸60～100mg/L、L-赖氨酸210～280mg/L、L-精氨酸60～80mg/L、L-组氨酸50～70mg/L、维生素D2 0.5～1.1mg/L、维生素B2 0.05～0.12mg/L、维生素B1 0.04～0.08mg/L、维生素B6 0.2～0.6mg/L、维生素A0.4～0.8mg/L、维生素E 0.020～0.050mg/L、维生素B12 30～60mg/L、维生素C7～17mg/L、氯化胆碱2.5～4.5mg/L、叶酸0.45～0.85mg/L、无水硫酸镁45～85mg/L、氯化钾400～600mg/L、碳酸氢钠1000～1600mg/L、氯化钠6000～10000mg/L、磷酸氢二钠600～1000mg/L、柠檬酸铁100～160mg/L、亚硒酸钠4.5～6.5μg/L、硅酸钠0.03～0.07μg/L、四水钼酸铵8～12μg/L、四水氯化锰0.2～0.6μg/L、七水硫酸锌100～160μg/L、氯化铬10～20μg/L、六水氯化钴4～8μg/L、氯化锡0.05～0.09μg/L、D-葡萄糖2500～3500mg/L、D-氨基葡萄糖4.5～6.5mg/L、β-巯基乙醇3～7mg/L、γ-氨基丁酸6～10mg/L、腺嘧啶脱氧核苷20～30mg/L、氯化胆碱0.6～1.0mg/L、脱氧胞苷45～65mg/L、脱氧尿苷40～90mg/L、脱氧腺嘌呤核苷15～45mg/L、Pluronic F-68 800～1200mg/L、谷胱甘肽20～30mg/L、β-NAD 8～14mg/L、β-NADP 6～10mg/L、胸苷45～75mg/L。

可选地，所述规模化生产病毒载体的无血清培养基组分具体如下：