[发明专利]一种多价肺炎球菌结合疫苗

权利要求书

1.一种多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，由液体注射剂和冻干粉剂两部分组成，其中，液体注射剂由15种肺炎球菌结合物制成，所述15种肺炎球菌结合物为1、2、3、4、5、6A、6B、7F、9V、12F、14、18C、19A、19F、23F血清型肺炎球菌荚膜多糖，与白喉类毒素为载体蛋白制备而成；冻干粉剂由8种肺炎球菌结合物制成，所述8种肺炎球菌结合物为8、10A、11A、15B、22F、24F、33F、35B血清型肺炎球菌荚膜多糖，与破伤风类毒素为载体蛋白制备而成；

其中，液体注射剂的15种肺炎球菌结合物，各型结合物的制备选择胺还原法，将肺炎球菌夹膜多糖用高碘酸钠氧化形成醛基，再直接或经由间隔物基团偶联至载体蛋白上，载体蛋白质是白喉类毒素；

其中，冻干粉剂的8种肺炎球菌结合物，各型结合物的制备选择氰基化反应，将肺炎球菌夹膜多糖用溴化氰或1-氰基-4-二甲基氨基吡啶四氟硼酸盐活化形成氰酸酯，再直接或经由间隔物基团偶联至载体蛋白上，载体蛋白质是破伤风类毒素。

2.根据权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，液体注射剂中还含有佐剂，佐剂是铝佐剂，铝佐剂是磷酸铝佐剂。

3.根据权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，冻干粉剂中还含有赋形剂，赋形剂为乳糖。

4.根据权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，每一次使用剂量，含有各型多糖1至5μg。

5.根据权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，15种肺炎球菌结合物的制备：溶解肺炎球菌多糖，经醋酸溶液水解后，调pH值至6.4，加入高碘酸钠氧化，甘油终止反应，透析或超滤去除小分子物质，获得氧化多糖，氧化多糖中加入ADH和硼氰化钠至终浓度40mg/ml和2mg/ml，室温反应3天，制备衍生物，衍生多糖和白喉类毒素按一定质量比混合，加入EDAC至终浓度0.02mol/L，维持pH值5.6反应150分钟以上，制备结合物，结合物经Sepharose 4FF层析纯化。

6.根据权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗，其特征在于，8种肺炎球菌结合物的制备：溶解肺炎球菌多糖，调整pH值至9.0，按质量比1∶0.75加入CDAP乙腈溶液，维持pH值为9.00-10.00反应，与CDAP等体积加入2％三乙胺溶液，pH值为10.00-11.00，反应5min，调整pH值为8.60，按适当多糖蛋白质量比加入破伤风类毒素，维持pH值8.60反应120分钟以上，甘氨酸终止反应，超滤或透析后获得多糖结合物，结合物经Sepharose 4FF层析纯化。

7.权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗的制备方法，其特征在于，用液体注射剂溶解冻干粉剂，后联合使用。

8.权利要求1所述的多价肺炎球菌结合疫苗在制备预防和/或治疗肺炎球菌所引起的感染的药物中的应用。