[发明专利]一种高效液相色谱法测定丙酚替诺福韦有关物质的方法

说明书

本发明提供一种高效液相法测定丙酚替诺福韦有关物质的方法，所述高效液相色谱条件为：使用C₁₈硅胶色谱柱，检测波长为260nm，流速为1.0ml/min，柱温为25‑30℃，进样量为10‑50μl，流动相由A相和B相组成，其中，A相中弱酸性缓冲盐溶液:有机溶剂的体积比为80.0‑99.9:1，B相中弱酸性缓冲盐溶液:有机溶剂的体积比为40‑60:60‑40，并进行梯度洗脱。本发明选择了普适性强的C₁₈硅胶柱对丙酚替诺福韦有关物质进行高效液相色谱检测，并优化了洗脱条件，可检测多种有关物质，具有操作简便、显著缩短洗脱时间、检测灵敏度高，分离度好、通用性高、成本低廉等优点，用于控制丙酚替诺福韦及其制剂的药品质量，保障安全用药。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种高效液相色谱法(HPLC法)测定丙酚替诺福韦(TAF)及其有关物质的方法。

背景技术

丙酚替诺福韦(简称TAF)是一种核苷类逆转录酶抑制剂，替诺福韦的前药，用于治疗伴有代偿性肝病的慢性乙肝感染。与替诺福韦二吡呋酯相比，本品具有更强的抗病毒活性，能更有效的进入淋巴组织。

CHAPMAN等(Nucleosides and Nucleic Acids，20(4-7):621-628,20010401)公开了丙酚替诺福韦的合成方法，步骤如下：

该路线反应过程中产生的非对应异构体等副产物难以分离，需要建立适用性良好的检测方法对丙酚替诺福韦原料药及其制剂中的有关物质进行质量控制。

CN111189947A公开了一种分离检测丙酚替诺福韦杂质的方法，以甲醇和酸性水溶液作为流动相梯度洗脱，分离并检测特定的异构体杂质，但并未检测潜在杂质，如降解杂质、工艺杂质等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效液相法测定丙酚替诺福韦有关物质的方法，所述高效液相色谱条件为：使用C₁₈硅胶色谱柱，检测波长为260nm，流速为0.8-1.5ml/min，柱温为25-30℃，进样量为10-50μl，流动相由A相和B相组成，其中，A相中弱酸性缓冲盐溶液:有机溶剂的体积比为80.0-99.9:1，B相中弱酸性缓冲盐溶液:有机溶剂的体积比为40-60:60-40，梯度洗脱条件为：