[发明专利]一种新的FJ染色方法和装置有效

专利信息
申请号: 202010720814.8 申请日: 2020-07-24
公开(公告)号: CN112014193B 公开(公告)日: 2021-06-15
发明(设计)人: 吴建华;李浩 申请(专利权)人: 武汉大学中南医院
主分类号: G01N1/31 分类号: G01N1/31
代理公司: 深圳市六加知识产权代理有限公司 44372 代理人: 崔肖肖;向彬
地址: 430071 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 fj 染色 方法 装置
【权利要求书】:

1.一种FJ染色方法,其特征在于,所需实验染色溶液配制包括0.1%Acetic acid配制、0.06%高锰酸钾配制、FJ储存液、80%乙醇配制的1%NaOH、70%乙醇、0.0001%FJ-C配制和PBS溶液配置,其中,PBS溶液配置包括精确称量8g NaCl、3.63g Na2HPO4·12H2O、0.2g KCl以及0.24g KH2PO4,将其溶于900mld2H2O中并定容至1000ml得到所述PBS溶液,染色方法过程包括:

先滴加5ml的80%乙醇配制的1%NaOH于多孔板中,再将缺血脑片放置于80%乙醇配制的1%NaOH中孵育3-6分钟;其中,每一孔用于容纳一待染色的脑片;

吸出80%乙醇配制的1%NaOH后,加入70%乙醇孵育1-3分钟;

再次吸出70%乙醇后,加入PBS后,再用双蒸水飘洗1-3分钟;

吸出双蒸水后,加入6ml 0.06%高锰酸钾溶液与脑片共孵育10分钟;

吸出高锰酸钾溶液后再次用加入PBS,待脑片完全展开后,再用双蒸水飘洗1-2次,每次1-2分钟;

将已展开的脑片贴于载玻片上;

室温瞭片过夜,充分干燥;

充分干燥后,双蒸水飘洗2分钟;

将贴片置于0.0001%FJ-C工作液避光浸染10分钟;

再次双蒸水飘洗1分钟,将贴片置于50℃烤箱中避光烘干;

二甲苯透明,进行封片;

通过设置在多孔板或者载玻片上方的摄像头,采集载玻片上染色脑片的铺展状态;

若采集到一个或者多个位置区域上的脑片发生翻折或者堆叠现象,则调配相应平整喷嘴到相应一个或者多个位置区域上方指定高度,并通过平整喷嘴的预设喷气作用,使得所述发生翻折或者堆叠现象的脑片展平;

所述平整喷嘴包括垂直稳态用出气口,一个或者多个与竖直线成指定角度的侧向出气口;

其中,各个侧向出气口对应设置有出气控制电磁阀,相应电磁阀用于控制对应的侧向出气口是否出气;

控制侧向出气口对应的电磁阀导通出气,是根据摄像头所采集到的脑片的翻折或者堆叠角度来确定的,具体的,将所述垂直稳态用出气口被调整到脑切片与载玻片贴合,并且没有被翻折或者堆叠部分覆盖的区域,通过所述摄像头采集图片确定相应翻折或者堆叠区域所对应的一个或者多个侧向出气口,并控制相应电磁阀导通出气。

2.根据权利要求1所述的FJ染色方法,其特征在于,所述0.1%Acetic acid配制包括0.2ml冰乙酸溶于199.8ml d2H2O。

3.根据权利要求1所述的FJ染色方法,其特征在于,所述0.06%高锰酸钾配制包括0.3g高锰酸钾溶于500ml d2H2O。

4.根据权利要求1所述的FJ染色方法,其特征在于,所述FJ储存液包括2mg FJ溶于10mld2H2O,并且,4°避光储存。

5.根据权利要求1所述的FJ染色方法,其特征在于,所述80%乙醇配制的1%NaOH包括先将1g NaOH溶于19ml d2H2O后,再加入80ml的无水乙醇。

6.根据权利要求1所述的FJ染色方法,其特征在于,所述0.0001%FJ-C配制包括1ml FJ储存液溶于99ml的0.1%冰乙酸中。

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