[发明专利]一种软枣猕猴桃开放式组培生根的方法

说明书

本发明公开了一种软枣猕猴桃开放式组培生根的方法，包括以下步骤：在培养基中加入抑菌剂，待用；将软枣猕猴桃组培苗接种到上述含有抑菌剂的培养基中培养。本发明通过在培养基中添加抑菌剂四氯间苯二甲腈，并对软枣猕猴桃开放式组培生根所需的生长素浓度及培养基中四氯间苯二甲腈的添加浓度进行了限定，实现了软枣猕猴桃开放式组培生根的技术目的，使得在对软枣猕猴桃进行组培生根时，无需严格无菌的操作环境、高压灭菌和超净工作台，也能实现良好的生根效果，从而可简化操作，减少工作量，同时显著降低组织培养工厂化育苗的成本。

技术领域

本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种软枣猕猴桃开放式组培生根的方法。

背景技术

目前，软枣猕猴桃的组织培养技术已经日渐成熟，但传统组培要求严格的环境条件，操作较为复杂，无疑增加了成本。而开放式组织培养是通过在培养基中添加抑菌剂，使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境，不需高压灭菌和超净工作台，在自然、开放的有菌环境中进行植物的组织培养，降低了环境要求，减少了操作环节，在设备、场地、能源等方面均显著降低了成本。日本等国开放组培已广泛应用于菊花及兰花等观赏植物的组织培养中，中国对香蕉、甘蔗、蝴蝶兰、马铃薯等开放组培已有研究。目前软枣猕猴桃组培快繁主要包括增殖和生根壮苗，尤其在生根壮苗阶段，生产材料及人工需求量均较高，因此研究生根阶段的开放式培养，可减少操作环节，降低成本，提高效率。目前尚鲜见关于软枣猕猴桃生根阶段开放式培养的相关报道。

发明内容

为解决现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种软枣猕猴桃开放式组培生根的方法，无需严格无菌的操作环境、高压灭菌和超净工作台，也能实现软枣猕猴桃良好的生根效果。

为实现上述技术目的，本发明提供了如下技术方案：一种软枣猕猴桃开放式组培生根的方法，包括以下步骤：

(1)在培养基中加入抑菌剂，待用；

(2)在步骤(1)所得含有抑菌剂的培养基中加入生长素，待用；

(3)将软枣猕猴桃组培苗接种到步骤(2)所得的含有抑菌剂及生长素的培养基中培养。

优选地，步骤(1)所述培养基为1/4MS的无糖固体培养基，所述抑菌剂为四氯间苯二甲腈，在培养基中浓度为0.2-0.5g/L。

四氯间苯二甲腈是保护性杀菌剂。作用机理是能与真菌细胞中的三磷酸甘油醛脱氢酶发生作用，与该酶中含有半胱氨酸的蛋白质相结合，从而破坏该酶活性，使真菌细胞的新陈代谢受破坏而失去生命力。四氯间苯二甲腈具有良好的黏着性，在碱和酸性水溶液中以及对紫外光照射，都是稳定的，药效期较长。

优选地，所述生长素为吲哚丁酸(IBA)，在培养基中浓度为0.01-0.05mg/L。

优选地，步骤(3)中，培养温度为20-24℃，光照强度为1600～2000lx，每天光照时间为10-14h，培养时间为18-22天。

优选地，步骤(3)中，在组培瓶或培养盒中进行培养。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明通过在培养基中添加抑菌剂四氯间苯二甲腈，可有效抑制菌的生长，抑菌和促根生长方面，均优于抑菌剂多菌灵。采用生长素添加到1/4MS无糖固体培养基中的方式实现了软枣猕猴桃开放式组培生根的技术目的，使得在对软枣猕猴桃进行组培生根时，无需严格无菌的操作环境、高压灭菌和超净工作台，也能实现良好的生根效果，从而可简化操作，减少工作量，同时显著降低组织培养工厂化育苗的成本。

2、本发明中对软枣猕猴桃开放式组培生根所需的生长素浓度及培养基中四氯间苯二甲腈的添加浓度进行了限定，采用本发明中的组培生根方法，能获得较高的成活率，且植株生长状态好，根白净、粗细均匀，外观形态佳，生根数量多，且植株具有较佳的株高，获得了良好的生根效果。

附图说明