[发明专利]检测乳制品中残留兽药的方法

权利要求书

1.一种检测乳制品中残留兽药的方法，其特征在于，包括：

将乳制品与高氯酸溶液进行混合，离心，收集上清液；

采用萃取柱对所述上清液进行萃取，收集萃取液；

将所述萃取液进行液相色谱-质谱检测，以便同时检测多种兽药残留；

其中，所述兽药选自头孢氨苄、头孢喹肟、头孢匹罗、青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、苯唑西林、林可霉素、替米考星、泰乐菌素、达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星、氟甲喹、环丙沙星、洛美沙星、麻保沙星、诺氟沙星、恶喹酸、培氟沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、依诺沙星、四环素、金霉素、土霉素、磺胺嘧啶、磺胺醋酰、磺胺多辛、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲唑、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺二甲基异嘧啶、磺胺二甲异噁唑、磺胺甲氧哒嗪、甲氧苄氨嘧啶和甲砜霉素；

所述萃取柱选自Cleanert PEP-2固相萃取柱；

基于1g所述乳制品，所述高氯酸溶液的添加量为0.5~2mL，浓度为0.2~0.8体积%；

所述液相色谱-质谱检测所采用的流动相：A为0.1体积%的甲酸水溶液，B为乙腈；

所述液相色谱-质谱检测所采用的液相色谱检测条件如下：

色谱柱：ACQUITY BEH C18，2.1*100mm，1.7μm；

梯度洗脱条件如下：

。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取柱预先经甲醇和水活化，其中，所述甲醇与水的体积比为1：0.5~1：1.5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取包括：

将所述上清液加入到萃取柱中，用水淋洗所述萃取柱，再用甲醇洗脱，收集流出的萃取液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述液相色谱-质谱检测之前，将所述萃取液在氮气下吹干，然后用乙腈水溶液混合，得到待测液，再将所述待测液进行所述液相色谱-质谱检测；

所述乙腈水溶液中乙腈和水的体积比为1：4~1：8。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱检测所采用的液相色谱检测条件如下：

柱温：40℃；

流速：0.3mL/min；

进样体积：1μL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乳制品选自生牛乳。

7.一种检测乳制品中残留兽药的方法，其特征在于，包括：

称取1.0g生牛乳试样于2mL离心管中，加入1mL 0.5体积%的高氯酸溶液后涡旋混匀，15000r/min离心10min，取上清液加入到预先经3mL甲醇、3mL水活化的Cleanert PEP-2固相萃取柱，再依次用水进行淋洗、用甲醇洗脱，收集流出的萃取液并在氮气下吹干，用乙腈与水的体积比为15:85的乙腈水溶液定容至1mL，过0.22µm有机滤膜，得到待测液，将所述待测液进行液相色谱-质谱检测，

其中，所述液相色谱的检测条件如下：

色谱柱：ACQUITY BEH C18，2.1*100mm，1.7μm；

柱温：40℃；

流动相：A为0.1体积%的甲酸水溶液，B为乙腈；

流速：0.3mL/min；

进样体积：1μL；

梯度洗脱条件如下：

；

所述兽药选自头孢氨苄、头孢喹肟、头孢匹罗、青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、苯唑西林、林可霉素、替米考星、泰乐菌素、达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星、氟甲喹、环丙沙星、洛美沙星、麻保沙星、诺氟沙星、恶喹酸、培氟沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、依诺沙星、四环素、金霉素、土霉素、磺胺嘧啶、磺胺醋酰、磺胺多辛、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲唑、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺二甲基异嘧啶、磺胺二甲异噁唑、磺胺甲氧哒嗪、甲氧苄氨嘧啶和甲砜霉素。