[发明专利]一种猴头菌发酵菌丝体β-葡聚糖及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种猴头菌发酵菌丝体β‑葡聚糖及其制备方法和应用，涉及猴头菌应用技术领域。本发明利用饱和硫酸铵盐析沉淀法对猴头菌发酵菌丝体20％醇沉大分子量多糖进行简单有效的分离纯化，成功分离富集到诱变产生的新差异多糖组分β‑葡聚糖(X10‑H3P20)。该葡聚糖具有显著地的体外激活巨噬细胞释放NO的活性，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于猴头菌应用技术领域，具体涉及一种猴头菌发酵菌丝体β-葡聚糖及其制备方法和应用。

背景技术

猴头菌[Hericium erinaceus(Bull.)Pers]属担子菌门(Basidiomycota)，伞菌纲(Agaricomycetes)，红菇目(Russulales)，猴头科(Hericiaceae)，广泛生长于亚洲东部山区，珍贵的食药兼用菌，在中医药领域有着悠久历史。猴头菌生物活性物质种类丰富，包括多糖、甾醇类、萜类、脂肪酸、酚类等化合物，猴头菌具有重要的生物反应调节剂能力，猴头菌多糖(β-葡聚糖)被公认为重要的活性物质，具有免疫调节、抗癌、降血脂、抗疲劳、抗胃炎、抗氧化和保护神经系统预防退行性脑疾病等功效。随着社会压力日益增大，人类癌症和慢性代谢疾病愈发严重，人们对生活质量要求不断提高，猴头菌日益成为功能性食品和药物研发的有力资源，近年来已被广泛应用于食品、医药、保健品和化妆品等领域，猴菇菌片、山珍精、猴头菇口服液、猴菇饮料、猴菇饼干等产品陆续面世，引起越来越多研究者的关注。

从猴头菌属真菌的子实体、菌丝体及菌丝发酵液中分离得到的多糖统称为猴头菌多糖。现代医学和药理学的很多研究表明，猴头菌多糖在提高机体免疫力、抗癌抑瘤、降血压、降血糖等多方面均具有一定的疗效。野生猴头菌天然资源有限，目前以人工栽培为主，但因其人工栽培也存在周期长、产量低的不足。而液体发酵可以在较短时间内获得大量的菌丝体及猴头菌多糖，具有生产周期短、产量高、成本低、工艺设备简单、可控性好等优点。深层发酵法还能够突破猴头菌生长的环境限制因素，能提供充足的养料供生物活性物质积累，更易于工业化持续大量生产，具有广泛的市场前景。

发明人前期通过ARTP诱变育种获得高产多糖的猴头菌株321，通过对高产多糖诱变菌株321菌丝体多糖和出发菌株(亲本菌株0605)菌丝体多糖理化特性和体外免疫活性比较，诱变前后多糖分子量分布差异主要集中在20％醇沉部分，诱变后菌丝体多糖产生一新的多糖组分，且相较亲本菌株具有更好的体外免疫活性，但菌丝体20％醇沉多糖组分分子量可高达千万级，通过凝胶柱层析和离子交换层析分离纯化困难。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种猴头菌发酵菌丝体大分子量多糖及其制备方法和应用。本发明利用饱和硫酸铵盐析沉淀方法对大分子量多糖进行分步纯化，并成功分离富集到差异多糖组分，经鉴定为β-葡聚糖，实现了一种猴头菌发酵菌丝体β-葡聚糖及其制备方法和应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种猴头菌发酵菌丝体β-葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：(1)将猴头菇发酵菌丝体20％醇沉多糖溶解于水中，向所述水中添加硫酸铵达30％饱和度，4℃静置8～12h后，离心收集沉淀；

(2)将所述沉淀复溶于蒸馏水后，流水透析48h后干燥，得X30-H3P20；

(3)将所述X30-H3P20溶解于水中，向所述水中添加硫酸铵达10％饱和度，4℃静置8～12h后，离心收集沉淀，得菌丝体β-葡聚糖X10-H3P20。

优选的，步骤(1)所述猴头菇发酵菌丝体20％醇沉多糖来源于猴头菇高产多糖菌丝体，所述猴头菇高产多糖菌丝体来源于菌株0605的ARTP诱变菌株321。

优选的，所述猴头菇发酵菌丝体20％醇沉多糖的制备方法，包括：(a)将所述ARTP诱变菌株321的干燥菌丝体与水混合后提取，将提取液浓缩；所述浓缩的浓缩比为1g:3ml；