[发明专利]超敏肌钙蛋白I磁微粒化学发光检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种超敏肌钙蛋白I磁微粒化学发光检测试剂盒及其应用，涉及生物技术领域。所述检测试剂盒包括校准品、质控品、第一抗试剂、第二抗试剂、磁微粒试剂和发光底物，其中，所述第一抗试剂为由异硫氰酸荧光素标记的第一肌钙蛋白I抗体和由异硫氰酸荧光素标记的第二肌钙蛋白I抗体按照体积比1:1混合而成的溶液；所述第二抗试剂为由碱性磷酸酶标记的第三肌钙蛋白I抗体和由碱性磷酸酶标记的第四肌钙蛋白I抗体按照体积比1:1混合而成的溶液；所述磁微粒试剂为由抗异硫氰酸荧光素抗体包被的磁性微球。本发明检测结果准确、特异性强、灵敏度高、线性范围宽、检测时间短、使用方便。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种超敏肌钙蛋白I磁微粒化学发光检测试剂盒及其应用。

背景技术

心肌肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I，cTnI)是与心肌损伤(Myocardial Injury，MI)高度相关的标志物。目前在诊断MI上，cTnI由于具有高敏感度、特异性好、持续时间长的优势，成为对急性冠状动脉综合症(Acute Coronary Syndrome，ACS)患者进行判断其MI风险的最佳标志物，已替代肌酸激酶同工酶MB(Creatine KinaseIsoenzyme MB，CK-MB)，成为诊断急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)的金标准。随着对心肌梗死及肌钙蛋白I的深入研究，临床上对肌钙蛋白I检测的灵敏度和实时性提出了更高要求。

在人体中，存在三种不同的TnI亚型，分别是心肌、快速骨骼肌和慢骨骼肌亚型，其中cTnI与心肌高度相关并且具有约29KDa的分子量。cTnI 与快速骨骼肌和慢骨骼肌亚型的序列同源性分别高达52％和46％。由于超敏cTnI对于抗体的交叉反应有着更高的要求，若患者外周sTnI升高，则可能会由于试剂的高灵敏度造成假阳性结果。因此确保与快速骨骼肌和慢骨骼肌亚型无交叉反应，是设计开发cTnI检测系统时必须考虑的因素。

当cTnI分子释放到血液后，很快就被蛋白水解酶分解成cTnI-cTnC 复合物形式和cTnT两种分子，因此即使血清中存在cTnI，也很少是以游离的形式存在，而是主要作为cTnI-cTnC复合物留在血液中。cTnI的中心部分可以与cTnC强烈相互作用，不易被内源性蛋白酶降解，并且具有显着改善的稳定性。因此，cTnI中心的表位比末端的表位稳定得多。但正因为如此，并非所有特异性结合cTnI分子中心部分的抗体都能识别cTnI，因为cTnC会竞争性的干扰抗体与cTnI分子的结合。

由于cTnI分子结构的特殊性，当对患者进行血液cTnI定量检测时，多种干扰因素，如：磷酸化、蛋白水解、自身抗体等均可能对检测结果造成影响，且根据检测试剂所使用的抗体的抗原表位不同，影响也不一样。目前市场上cTnI的检测系统均选择一对或两对可捕获cTnI分子的抗体，该检测体系除了在检测血清样本中的cTnI-cTnC复合物时易受cTnC的竞争性影响，同时还易受到磷酸化、蛋白水解等的干扰，因此寻求一种灵敏度更高，检测结果更为准确的cTnI检测系统极为必要。

发明内容

本发明提供一种检测结果准确、特异性强、灵敏度高、线性范围宽、检测时间短、使用方便的超敏肌钙蛋白I磁微粒化学发光检测试剂盒及应用。

为解决上述技术问题，本发明提供技术方案如下：

一种超敏肌钙蛋白I磁微粒化学发光检测试剂盒，包括校准品、质控品、第一抗试剂、第二抗试剂、磁微粒试剂和发光底物，其中，

所述第一抗试剂为由异硫氰酸荧光素标记的第一肌钙蛋白I抗体和由异硫氰酸荧光素标记的第二肌钙蛋白I抗体按照体积比1:1混合而成的溶液；

所述第二抗试剂为由碱性磷酸酶标记的第三肌钙蛋白I抗体和由碱性磷酸酶标记的第四肌钙蛋白I抗体按照体积比1:1混合而成的溶液；

所述磁微粒试剂为由抗异硫氰酸荧光素抗体包被的磁性微球。