[发明专利]一种结合紧密连接蛋白-18.2的抗体及其用途

说明书

本公开涉及一种结合紧密连接蛋白‑18.2的抗体或其抗原结合部分及其用途。该抗体可高亲和性地结合紧密连接蛋白‑18.2，可用于检测紧密连接蛋白‑18.2蛋白，诊断、治疗或预防与紧密连接蛋白‑18.2的细胞相关的疾病。

技术领域

本发明涉及一种结合紧密连接蛋白-18的抗体及其用途，特别是结合紧密连接蛋白-18.2的抗体及其用途。

背景技术

紧密连接蛋白（Claudin）是一类建立细胞旁屏障并控制细胞间分子流动的细胞表面蛋白家族，由Shorichiro Tsukita等人在1998年首次报道(Furuse et al.，(1998)JCell Biol 141(7):1539-1550)。Claudin是紧密结合的必需成分，在保持上皮细胞极性、控制细胞旁扩散以及调控细胞生长分化方面起到重要作用。

紧密连接蛋白-18（Claudin 18）属于紧密连接蛋白Claudin家族，有四个跨膜结构域，N端和C端位于胞内，具有两个胞外区。由于外显子1的选择性剪切，Claudin 18存在两种剪接异构体Claudin 18.1和Claudin 18.2，均由261个氨基酸组成，Claudin18.2在N端有不同序列，其中第一胞外区中仅8个氨基酸不同。在人体中，Claudin 18.1和Claudin 18.2的表达具有组织特异性，Claudin 18.1主要表达在肺、胃和膀胱等正常组织中；Claudin 18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常的组织中仅表达在分化的胃粘膜上表皮细胞上，不表达在胃干细胞上，而在原发性胃癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、肺癌及其转移灶中高表达，因此，Claudin 18.2在肿瘤上的频繁过表达使该分子有资格成为用于开发针对Claudin 18.2的治疗剂（如疫苗治疗剂和治疗性抗体）的极具潜力的肿瘤治疗新靶点。

实现肿瘤样本免疫组化（immunohistochemistry，IHC）染色的准确检测需要高度特异的肿瘤标志物抗体。在早期研究中，曾使用识别Claudin 18中段序列的兔抗体，检测到原发性胃癌中56%为中等至强阳性（≥IHC 2+）（Sahin et al., (2008) Clinical CancerResearch, 14(23), 7624-7634）；而使用商业化抗体（克隆EPR19202, Abcam）检测，Claudin 18.2中等至强阳性（≥IHC 2+）仅约14.1%，弱阳性（≥IHC 1+）为13.3%（Dottermusch et al., (2019) Virchows Archiv, 475(5): 563-571）。另一个在临床研究中使用的是鼠单抗41-14A，但该抗体针对Claudin 18 C端共同序列的抗体，不能区分临床样本Claudin 18.2和Claudin 18.1的表达（US9512232B2）。

发明内容

本发明利用杂交瘤技术，获得多个识别紧密连接蛋白-18的单克隆抗体，特别是高亲和力结合紧密连接蛋白-18.2（Claudin 18.2）的单克隆抗体。高亲和力结合紧密连接蛋白-18.2的抗体可用于IHC检测，可对紧密连接蛋白-18.2阳性肿瘤细胞的分布、细胞表达和靶向治疗效果提供判断依据。

因此，在一方面，本公开提供了结合紧密连接蛋白-18.2蛋白的抗体或其抗原结合部分。

在一方面，本公开提供了包含前述方面的抗体或其抗原结合部分的双特异性或多特异性分子

在一方面，本公开提供了编码如前述方面的抗体或其抗原结合部分或双特异性或多特异性分子的核酸。

在一方面，本公开提供了包含前述方面的核酸的载体。

在一方面，本公开提供了包含前述方面的载体的细胞。

根据前述任一方面的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体或其抗原结合部分是人源化的。

在一方面，本公开提供了包含如前述任一方面的抗体或其抗原结合部分或其编码核酸和药学上可接受的载体的药物组合物或试剂盒。