[发明专利]人源降钙素原的单克隆抗体其制备方法和用途在审
| 申请号： | 202010638636.4 | 申请日： | 2015-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN111793132A | 公开（公告）日： | 2020-10-20 |
| 发明（设计）人： | 叶森;唐勇;何仕钊;汪金凤 | 申请（专利权）人： | 南京诺尔曼生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/26 | 分类号： | C07K16/26;G01N33/74;G01N33/577;C12N5/20;C07K14/585;C12N15/70;C12N15/16;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人： | 孟潭 |
| 地址： | 210000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 降钙素 单克隆抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种与人源降钙素原特异性结合的抗降钙素原抗体，其中所述抗降钙素原抗体与保藏号为CGMCC No.10417的杂交瘤细胞系产生的降钙素原单克隆抗体特异性结合相同的降钙素原表位。
2.根据权利要求1所述的抗降钙素原抗体，其包含保藏号为CGMCC No.10417的杂交瘤细胞系产生的降钙素原单克隆抗体的人源化序列。
3.根据权利要求1所述的抗降钙素原抗体，其中所述抗降钙素原抗体是单克隆抗体。
4.根据权利要求1所述的抗降钙素原抗体，其中所述抗降钙素原抗体特异性结合具有氨基酸序列为RLLLAALVQDYV(SEQ ID NO:1)的表位。
5.根据权利要求1所述的抗降钙素原抗体，其中所述抗降钙素原抗体获得自保藏号为CGMCC No.10417的杂交瘤细胞系。
6.含有权利要求1-5任一项所述的抗降钙素原抗体的免疫检测试剂，其用于检测或者定量降钙素原或其片段。
7.根据权利要求1-5任一项所述的抗降钙素原抗体的用途，其用于制备检测或者定量降钙素原或其片段的免疫检测试剂的用途。
8.根据权利要求1-5任一项所述的抗降钙素原抗体的用途，其用于制备检测或者定量降钙素原或其片段的试剂盒的用途。
9.含有权利要求1-5任一项所述的抗降钙素原抗体的试剂盒，其用于检测或者定量降钙素原或其片段。
10.一种产生降钙素原单克隆抗体的杂交瘤细胞系，其保藏号为CGMCC No.10417。
11.一种制备抗降钙素原抗体的方法，包括以下步骤：
(1)对降钙素原N端氨基酸残基进行突变，获得与突变后氨基酸残基序列相对应的核苷酸序列；
(2)将所述核苷酸序列插入到原核表达载体中，进行诱导表达以及蛋白纯化；
(3)将纯化蛋白作为抗原免疫动物，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，经筛选获得可稳定分泌抗降钙素原抗体的杂交瘤细胞，并获得相应单克隆抗体。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述突变是针对降钙素原第1至57位氨基酸残基进行的。
13.根据权利要求11-12任一项所述的方法，其中突变后的降钙素原氨基酸序列为SEQID NOs:2-4。
14.根据权利要求11-13任一项所述的方法制备的抗体。
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