[发明专利]一种测定藜芦中化学成分含量的方法

说明书

本发明提供了一种测定藜芦中化学成分含量的方法，采用超高效液相色谱‑质谱联用，同时测定藜芦中8种化学成分的含量；所述8种化学成分包括：藜芦托素、环巴胺、芥芬胺、藜芦胺、虎杖苷、槲皮素、芹菜素、白藜芦醇。采用本申请的方法，通过合理选择色谱条件和质谱条件，可以同时测定藜芦中8种化学成分的含量，且所述方法具有简便、灵敏度高、分析速度快、专属性强等优势，从而可用于藜芦药材的质量控制。

技术领域

本发明涉及中药成分测定技术领域，具体涉及一种测定藜芦中化学成分含量的方法。

背景技术

藜芦作为一味中国传统中药，现代药理研究发现其具有降压、杀虫的作用，又因其中含有生物碱类成分，具有强刺激性，故而口服能催吐祛痰。藜芦中含有不同种类的成分，包括甾体类生物碱，茋类化合物，二肽类化合物，二苯乙烯类化合物、黄酮类化合物及其他类型化合物等。近些年，研究者对藜芦的化学成分进行了较多探究，对芥芬胺、藜芦胺等含量较高的成分进行了测定，而对于其他活性成分并未进行过系统的含量分析，因此需要建立一种全新的藜芦中化学成分含量测定方法，以能够更加可信、全面地对藜芦进行质量控制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定藜芦中化学成分含量的方法，用以同时测定藜芦药材中藜芦托素、环巴胺、芥芬胺、藜芦胺、虎杖苷、槲皮素、芹菜素、白藜芦醇8种化学成分的含量，可用于藜芦药材的质量控制。

本申请提供了一种测定藜芦中化学成分含量的方法，采用超高效液相色谱-质谱联用，同时测定藜芦中8种化学成分的含量；所述8种化学成分包括：藜芦托素、环巴胺、芥芬胺、藜芦胺、虎杖苷、槲皮素、芹菜素、白藜芦醇，所述方法包括：

(1)建立8种化学成分的标准曲线

以体积分数为60-100％的甲醇为溶剂，配制5-10个含有不同已知浓度的8种化学成分的混合对照品溶液；其中，环巴胺浓度为0.1-250ng/mL，藜芦托素、芥芬胺、槲皮素的浓度分别为0.1-450ng/mL，芹菜素的浓度为0.2-450ng/mL，白藜芦醇浓度为0.1-2000ng/mL，藜芦胺浓度为0.1-3500ng/mL，虎杖苷浓度为0.2-8000ng/mL；

在相同的色谱条件和质谱条件下，将体积V₁的各混合对照品溶液分别注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测确定各色谱峰的化学成分，并获得各化学成分的色谱峰面积；

其中，所述色谱条件包括：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相：A相为体积分数为0.05-0.15％的甲酸水溶液，B相为乙腈；采用体积分数53-85％A相，15-47％B相，梯度洗脱；流速：0.2-0.4mL/分钟；柱温：15-25℃；进样量V₁:3-8μL；

以各化学成分色谱峰的峰面积为纵坐标，以各化学成分的浓度为横坐标，分别建立各化学成分的标准曲线；

(2)获得待测样品溶液的色谱峰面积；

将质量为M的待测样品，以体积为V₂的体积分数为60-80％乙醇水溶液进行回流提取，取上清液过滤后作为待测样品溶液，其中，M/V₂为1：(10-20)g/mL；

在与步骤(1)中相同的色谱条件和质谱条件下，取体积V₁的待测样品溶液注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测确定各色谱峰的化学成分，并获得各化学成分的色谱峰面积；

(3)确定待测样品中8种化学成分的含量；

根据已建立的各化学成分的标准曲线，由待测样品溶液中各化学成分的色谱峰面积，分别获得各化学成分的浓度C₁，并按照下列公式分别计算出待测样品中8种化学成分的含量C；