[发明专利]目的蛋白纯化方法在审
申请号: | 202010599784.X | 申请日: | 2020-06-28 |
公开(公告)号: | CN113845561A | 公开(公告)日: | 2021-12-28 |
发明(设计)人: | 赵雪冰;王妮 | 申请(专利权)人: | 佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖阳 |
地址: | 528315 广东省佛山市顺德区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 目的 蛋白 纯化 方法 | ||
1.一种目的蛋白纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理,以便获得含有目的蛋白的洗脱液,所述亲和层析柱加载有待测样品,所述待测样品中含有待纯化目的蛋白,
其中,所述洗脱缓冲液中含有糖类物质。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述糖类物质包括选自蔗糖、葡萄糖和乳糖至少之一。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述糖类物质在所述洗脱缓冲液中的浓度为0.1M-1M。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述洗脱缓冲液包括选自柠檬酸缓冲液、乙酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液的至少一种。
5.根据权利要求2~5任一项所述的方法,其特征在于,所述洗脱缓冲液的pH为3-4。
6.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述洗脱缓冲液的pH为3.4-3.6。
7.根据权利要去1所述的方法,其特征在于,使用预装有中和液的容器收集所述洗脱液。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述待测样品包括选自发酵液和细胞培养物的至少之一。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述亲和层析柱为Protein A亲和层析柱、Protein G亲和层析柱或Protein L亲和层析柱。
10.一种通过Protein A亲和层析柱纯化目的蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:
利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理,以便获得含有目的蛋白的洗脱液,所述亲和层析柱加载有待测样品,所述待测样品中含有待纯化目的蛋白,
其中,所述洗脱缓冲液为100mM柠檬酸缓冲液,所述洗脱缓冲液中包括0.1M-1M的糖类物质,所述洗脱缓冲液的pH为3.4-3.6,所述待测样品为细胞培养物,
任选地,所述糖类物质包括选自蔗糖、葡萄糖和乳糖的至少之一。
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