[发明专利]一种裸花紫珠鉴别方法在审
申请号: | 202010586216.6 | 申请日: | 2020-06-24 |
公开(公告)号: | CN113834881A | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 黄璐琦;康利平;黄胜;郭兰萍;王凌;张小波;李伟;叶惠煊;徐向平;袁莉 | 申请(专利权)人: | 海南九芝堂药业有限公司;九芝堂股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72 |
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地址: | 570311 海南省海口*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫珠 鉴别方法 | ||
本发明涉及药物分析技术领域,具体为一种裸花紫珠鉴别方法。本发明通过LC‑MS对紫珠属植物进行代谢组分析,结合数理统计分析,从紫珠属植物的所有代谢物中广泛筛选,得到能够用于区分裸花紫珠与其他紫珠属植物的关键指标成分,结合聚类分析,实现更精准的区分裸花紫珠与其他紫珠属植物。
技术领域
本发明涉及中药药物分析技术领域,具体为一种裸花紫珠快速鉴别方法。
背景技术
裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.etArn),是一种常用的海南传统民族药材,具有抗菌止血、消炎解毒、散瘀消肿、祛风祛湿功效,用于跌打肿痛、风湿肿痛、肺结核咳血、胃肠出血等症。
近年来,随着裸花紫珠系列产品的临床疗效获得医生和患者的认可和广泛使用,国内外对裸花紫珠的研究热度也越来越高,裸花紫珠因具有治疗效果好、副作用小等优点,裸花紫珠制剂市场占有额也逐年增长,在利益的驱使下,现今市场上裸花紫珠基源应用混乱,同物异名、同名异物现象也较为严重。
在CN110568113A专利申请公开了一种裸花紫珠活性特征的指纹图谱及其快速鉴别方法,以相似度评价和主成分分析评价来快速鉴别裸花紫珠,其主要通过采用二极管阵列检测器和QTOF-MS/MS对裸花紫珠活性特征指纹图谱在线快速成分分析和鉴定苯丙烯酸类衍生物与黄酮类成分峰;以相似度评价和主成分分析评价快速鉴别裸花紫珠与其它紫珠属药材。该申请文件中提供了裸花紫珠与云南杜虹花、广东紫珠、大叶紫珠、小叶紫珠、批把叶紫珠的鉴别,所选取的区别成分为苯丙烯酸类衍生物与黄酮类成分,共19个共有峰。
由于紫珠属的植物种类较多,需要一种更精准的鉴别方法,来实现对裸花紫珠原药材的质控研究。
发明内容
本发明的目的在于提供一种裸花紫珠鉴别方法,包括:建立紫珠属植物的化合物数据库,用LC-MS检测及代谢组学分析(如QI软件)提取紫珠属植物的成分的色谱、质谱信息;结合化学计量学方法对已测定的色谱、质谱信息进行统计学分析,筛选出指标成分,用于快速鉴别裸花紫珠。
进一步地,所述的一种裸花紫珠鉴别方法,包括下列内容:建立紫珠属植物的化合物数据库,用LC-MS检测及代谢组学分析(如QI软件)提取紫珠属植物的成分的色谱、质谱数据信息;结合化学计量学方法对已测定的色谱、质谱数据信息进行统计学分析,筛选出指标成分,将待测样品的色谱、质谱数据信息导入到分析软件(如Ezinfo软件)中进行PCA统计分析,通过样品聚类情况鉴别样品是否为裸花紫珠。
进一步的,所述的一种裸花紫珠鉴别方法,所述LC-MS检测步骤,包含紫珠属植物供试品溶液的制备,确定LC-MS(如UPLC-MS)分析条件,将制备的紫珠属植物样品进样,测定。
进一步的,所述的一种裸花紫珠鉴别方法,其所述LC-MS检测步骤,其中紫珠属植物供试品溶液的制备方法:取紫珠属植物样品,烘干并粉碎后,加入10-30倍的50-90%的醇类溶剂超声提取20-40min,超声1-3次,10000-15000r离心10-20min,取上清液,过0.22μm滤膜,备用,分别取等量不同种的紫珠属植物样品溶液混合均匀后作为混合样品;其中,醇类溶剂的浓度优选为50-80%或60-90%或70-80%,醇类溶剂为甲醇或乙醇,超声时间优选为为25-35分钟。
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