[发明专利]一种抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物、及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物，该疫苗组合物包含有免疫量的H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原和药学上可以接受的载体，该H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原由H7亚型禽流感病毒HA、NA、M1抗原蛋白组装而成。本发明的抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物在低免疫量时即能达到更高免疫量的灭活疫苗的免疫效果，产生高滴度抗体更短，对禽产生保护，且本发明的疫苗组合物稳定性好，有利地保障了其免疫原性的稳定性和持久性。

技术领域

本发明涉及生物制药领域，特别涉及一种提供针对禽流感病毒进行保护的病毒样颗粒疫苗、及其制备方法和应用。

背景技术

病毒样颗粒(Virus-like particles，VLPs)，是由病毒的结构蛋白组装而成的介于15nm～400nm的空心颗粒。VLPs的制备可以通过体外高效表达某种病毒的一种(或几种)结构蛋白，使其自动装配成在形态上类似于天然病毒的空心颗粒。其方法主要是将病毒结构蛋白基因克隆到表达载体中，再将这些载体转入原核或真核细胞中进行表达。

禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)属于正粘病毒科，流感病毒属，A型流感病毒。禽流感(Avian Influenza，AI)是由该病毒引起的禽类感染和疾病综合症。国际兽医局(OIE)和我国《家畜家禽防疫条例》均将该病列为A类烈性传染病。目前在世界上许多国家和地区都有该病发生的报道，其中尤为以H7亚型毒株引起的高致病性禽流感(HPAI)更为严重，其以突然发病和高死亡率为主要特征，常常导致饲养鸡群的全部死亡。

截止到目前，接种全病毒疫苗仍然是预防和控制禽流感病毒流行的最有效手段。然而，由于禽流感病毒的变异速度远远大于变异株相应疫苗的研发制备速度，而且不同亚型之间几乎不产生交叉免疫保护，因此禽流感疫苗的生产需要时时、不断更新，而针对流感病毒流行株相应疫苗的生产周期较长、生产成本较高，造成人力、物力的浪费，还有可能达不到理想的防控效果。而禽流感病毒样颗粒疫苗采用基因工程技术，研发周期短，特别是真核表达体系、原核表达体系和酵母表达体系的生产成本可控，能避免上述缺点。

目前现有技术中文献研究发表的禽流感病毒样颗粒疫苗虽然能产生较好的免疫应答，但依然达不到商品化全病毒疫苗的免疫效果，且稳定性较差，为此，筛选理想的禽流感毒株序列制备一种免疫效果良好、安全、成本可控的禽流感病毒样颗粒疫苗是当务之急，也符合国家提出的有效防控重大动物疫病，保障畜牧业健康可持续发展的需要。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包含有免疫量的H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原和药学上可以接受的载体，所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原由H7亚型禽流感病毒HA、NA、M1抗原蛋白组装而成，所述H7亚型禽流感病毒HA抗原蛋白如Seq ID No.2所示，所述H7亚型禽流感病毒NA抗原蛋白如Seq ID No.3所示，所述H7亚型禽流感病毒M1抗原蛋白如Seq ID No.4所示。

本发明的H7亚型禽流感病毒HA抗原蛋白如Seq ID No.2所示氨基酸序列为Seq IDNo.1所示氨基酸序列人工缺失、插入、突变而来：LWF_526-528、G₅₃₁、AIVMG_539-543缺失，I_532-533、CVV_537-538、MWACQ_547-548插入，I536L、V545G突变。所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原具有良好的免疫原性，能提供对H7亚型禽流感病毒的完全保护，其免疫效力与相同HA抗原含量的灭活苗相当或更优。

本发明的H7亚型禽流感病毒HA抗原蛋白免疫原性好，较商品化全病毒灭活疫苗免疫效果更好，免疫反应更快；经突变后，其组装的H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原稳定性显著增加，热稳定性、低温稳定性均较未突变前显著增加，在2-8℃保藏12个月其免疫原性没有改变。