[发明专利]一种抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物、及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种抗H7亚型禽流感病毒的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包含有免疫量的H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原和药学上可以接受的载体，所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原由H7亚型禽流感病毒HA、NA、M1抗原蛋白组装而成，所述H7亚型禽流感病毒HA抗原蛋白如Seq ID No.2所示，所述H7亚型禽流感病毒NA抗原蛋白如Seq ID No.3所示，所述H7亚型禽流感病毒M1抗原蛋白如Seq ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原含量为HA效价≥6log2；优选地，所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原含量为HA效价6log2～8log2。

3.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述药学上可以接受的载体为佐剂，所述佐剂选自：(1)矿物油、铝胶佐剂、皂苷、阿夫立定、DDA；(2)油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂；或(3)丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物；以及RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽、Montanide ISA 206、Gel佐剂中的一种或几种；优选地，皂苷为Quil A、QS-21、GPI-0100；

优选地，所述佐剂为矿物油佐剂，其用于制备油包水乳剂；

所述佐剂含量为5％-70％V/V，优选从30％-70％V/V，更优选66％V/V。

4.一种制备权利要求1所述疫苗组合物的方法，其中，所述方法包括：

步骤(1)将所述H7亚型禽流感病毒HA、NA、M1抗原蛋白基因克隆到同一载体；

步骤(2)将所述步骤(1)获得的载体经转化重组获得含有所述HA、NA、M1抗原蛋白基因的重组杆状病毒表达质粒；

步骤(3)将所述步骤(2)获得的所述含有HA、NA、M1抗原蛋白基因的重组杆状病毒表达质粒转染昆虫细胞sf9，串联表达所述HA、NA、M1抗原蛋白；以及

步骤(4)分离在昆虫细胞内自我组装完成后释放到细胞外培养基上清中的由所述HA、NA、M1抗原蛋白组装而成的禽流感病毒样颗粒抗原，加入佐剂，混匀得到所述的疫苗组合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述步骤(1)的所述表达载体为pFastBac I；所述步骤(2)中所述的杆状病毒质粒为Bacmid。

6.根据权利要求1～3所述的禽流感病毒样颗粒疫苗在制备预防和/或治疗禽流感病毒导致的疾病的药物中的应用。

7.一种H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原，其中，所述H7亚型禽流感病毒样颗粒抗原由H7亚型禽流感病毒HA、NA、M1抗原蛋白组装而成，所述H7亚型禽流感病毒HA抗原蛋白如Seq IDNo.2所示，所述H7亚型禽流感病毒NA抗原蛋白如Seq ID No.3所示，所述H7亚型禽流感病毒M1抗原蛋白如Seq ID No.4所示。